Study of opportunist intestinal protozoars through the polymerase chain reaction (PCR), in Goiânia-GO, Brazil (1999-2007)

Autor: Souza Júnior, Edson Sidião de
Přispěvatelé: García-Zapata, Marco Tulio Antonio, Garcia-Zapata, Marco Túlio Antonio, Gomes, Abraão Garcia, Anunciação, Carlos Eduardo, Lacerda, Elisângela de Paula Silveira, Carneiro, José Roberto
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2008
Předmět:
Zdroj: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG
Universidade Federal de Goiás (UFG)
instacron:UFG
Popis: Os Coccídios do gênero Cryptosporidium, Cyclospora (Filo Apicomplexa) e os Microsporídios (Filo Microspora) são responsáveis por quadros clínicos com expressivos índices de morbi-mortalidade, preferencialmente em pacientes com comprometimento do Sistema Imunológico. A ocorrência desses agentes tem sido subestimada em nosso meio, seja pelo desconhecimento por parte dos profissionais da saúde, como por existirem poucos laboratórios qualificados para sua identificação. O reconhecimento da espécie desses protozoários que está causando a infecção é fundamental para guiar a terapêutica a ser adotada e definição do prognóstico do indivíduo infectado. Este reconhecimento só é possível através da Microscopia eletrônica e de técnicas biomoleculares, destacando-se a técnica da Reação da Polimerase em Cadeia (PCR). Considerando importância da água na veiculação destes agentes, o monitoramento ambiental, realizado com técnicas viáveis e eficientes, é de extrema importância epidemiológica. O presente estudo faz parte de um estudo longitudinal, desenvolvido no IPTSP/UFG, sobre o perfil clínico, epidemiológico e laboratorial destes agentes. Visa especificamente descrever a padronização e o uso do PCR no diagnóstico laboratorial das enteroparasitoses oportunistas em amostras clínicas humanas e como instrumento de monitoramento de águas de consumo humana, no município de Goiânia-GO, além de conter uma revisão sistemática da literatura que aborada tal uso deste instrumento na identificação destes parasitos em populações com déficit imunitário e imunocompetentes. O estudo foi realizado entre outubro 1999 e dezembro 2007. No total foram avaliados 994 pacientes: sendo 664 pacientes com diarréia e/ou com algum tipo de imunossupressão e/ou imunodepressão procedentes dos hospitais-escola da UFG e de unidades referências em assistência à Saúde de Goiás; e 330 indivíduos da comunidade, selecionados aleatoriamente, aparentemente imunocompetentes, e provenientes de Unidades de Saúde de referência (amostra única). Todas as amostras (2526 amostras de fezes) foram submetidas a técnicas de HPJ, Rugai e colorações específicas para o diagnóstico de Coccídios (Kinyoun à quente) e Microsporídios intestinais (Hot-Chromotrope-Kokoskin), com concentração coprólogica prévia pela técnica de formalina-acetato de etila. Os achados laboratoriais genéricos de infecção por estes agentes, no total 45 amostras, foram confirmados pela técnica de PCR. A confirmação e a identificação da espécie pelo PCR indicaram a presença do Encephalitozoon intestinalis, Enterocytozoon bieneusi, Cryptosporidium parvum/hominis e Cyclospora cayetanensis nas amostras clínicas analisadas. A padronização da técnica de PCR para amostras ambientais (água) foi feita a partir de um levantamento realizado nos rios e lagos do município de Goiânia. Dentro desse quantitativo foi identificado oocistos de Cryptosporidium parvum/hominis, demonstrando a viabilidade do PCR para análises ambientais que busquem a presença de enteroparasitos oportunistas na água. Estes achados revelam, por um lado, que estes agentes estão presentes em nosso meio podendo causar infecções isoladas ou associadas (co-infecções), entre eles ou com outros agentes infecto-parasitarios, constituindo-se num risco para as populações de pacientes imunosuprimidos; e por outro, sugerem na necessidade de implantar, técnicas diagnósticas mais aprimoradas, para definir os aspectos clínicos e epidemiológicos das parasitoses intestinais oportunistas humanas em nosso estado. The Coccidia (Phylum Microspora) and Microsporidia (Phylum Apicomplexa) are responsible for a range of clinical pictures, and with important mortality rate, usually in patients with compromising of the immunological system. Its occurrence has been underestimated in our milieu maybe for the lack of knowledge on the part of the professionals of the health, or, by existence of a few qualified laboratories for its identification. The recognition of the species causing the infection is fundamental to guide the therapeutic handling to be adopted and definition of the infected patient's prognostic. This recognition is only possible through electronic Microscopy and of biomolecular techniques, standing out the of the Polymerase Chain Reaction (PCR). The present study it is part of a longitudinal study, developed in the IPTSP/UFG, on the clinical profile, epidemiologist and laboratorial of these agents. It specifically aims at to describe the standartization and the use of the PCR in the laboratorial diagnosis of opportunist protozoa in clinical samples human beings and as instrument of study of consumption waters human being in the city of Goiânia-GO, basic instrument for the control of these protozoa. The study it was carried through between october 1999 and december 2007. In the total were appraised 994 patient: 1) 664 immunocompromissed patients (with immunossuppression or immunodepression) with diarrhea coming from the School Hospital of UFG and of reference units in attendance to the health of the Goiás State; 2) 330 individuals from the community, by aleatory selection seemingly without disturbances of immunological systems and coming of the health reference units (unique sample). All of the samples were submitted to techniques of HPJ, Rugai and specific colorations for the diagnosis of the Coccidia (Hot Kinyoun) and intestinal Microsporidia (Hot-Chromotrope-Kokoskin), with previous coprological concentration through the ethyl formalin-acetate technique. The suggestive laboratorial infections were confirmed by the PCR technique, when the sample was enough. The confirmation and the identification of the species for PCR indicated the presence of the Encephalitozoon intestinalis, Enterocytozoon bieneusi, Cryptosporidium parvum/hominis in the analyzed samples. The standardization of the technique of PCR for ambient samples (water) was made from a survey carried through in the rivers and lakes of the city of Goiânia-GO. Inside of this quantitative one was found of Cryptosporidium parvum/hominis, demonstrating the viability of the PCR for ambient analyses that search the presence of opportunist protozoa in the water. These findings reveal, on one side, that these agents are present in ours milieu causing infections isolated or associated (co-infections), among them or with other infect-parasitic agents, being constituted in a risk for the populations of immunocompromised patients; and for other hand, they suggest in the need of implanting, more improvement diagnosis techniques, to define the clinical and epidemiological aspects of opportunistic protozoa species circulating in the Goiás State.
Databáze: OpenAIRE