Expresión y purificación del citocromo P450BM3 con el dominio reductasa de Bacillus megaterium para la activación de profármacos
| Autor: | CARLOS ALEJANDRO MEDRANO VILLAGOMEZ |
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| Přispěvatelé: | ANDRES ZARATE ROMERO, Rafael Vázquez Duhalt |
| Jazyk: | Spanish; Castilian |
| Rok vydání: | 2020 |
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| Zdroj: | Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada CICESE Repositorio Institucional CICESE |
| Popis: | La utilización de estructuras nanométricas en el área médica ha tomado fuerza en los últimos años. Dentro de este contexto, las nanopartículas proteínicas derivadas de virus (VLP´s) han sido empleadas ampliamente como vehículos para la entrega intracelular de DNA, RNA, fármacos y proteínas. Una de las patologías con mayor impacto social actualmente y apta para ser tratada con sistemas nanométricos, es el cáncer de mama. Desde 1980, el tamoxifeno es el principal fármaco para el tratamiento de cáncer de mama. Sin embargo, la efectividad de este profármaco se ve abatido por la disminución de la concentración de enzimas que lo activan en el tejido tumoral. Estas enzimas principalmente pertenecen a la familia de los citocromos P450 (CYP). Por lo que el diseño y caracterización de sistemas de entrega basados en bionanorreactores ensamblados a partir de VLP’s y una enzima CYP, es una propuesta para aumentar la eficiencia de oxidación de profármacos anticancerígenos. En este proyecto se llevó a cabo la expresión y purificación CYPBM3 dependiente de NADPH, para la oxidación de profármacos como el tamoxifeno de manera intracelular y proponer el diseño de una nanorreactor con posible potencial terapéutico. The use of nanometric structures in the biomedical field has strongly increased in the last years. Among them, the protein-based nanoparticles from virus or virus-like particles (VLP’s) have been widely used as nanocarriers for cell delivery of DNA, RNA, drugs and proteins. Breast cancer is an illness with high social impact that can be treated with nanometric systems. Since 1980, tamoxifen is the major drug for the breast cancer treatment, however, its efficiency is reduced by the low concentration of activating enzymes in the tumor tissue. These enzymes mainly belong to the cytochrome P450 family (CYP). Thus, the design and characterization of delivery systems based on VLP`s containing CYP activity, as enzymatic nanoreactors, to increase the activation efficiency of prodrugs for cancer treatment is proposed. In this work the expression and purification of CYPBM3 using NADPH as source of electrons for the oxidation of prodrugs such as tamoxifen has been carried out, in order to design a nanoreactor with potential biomedical applications. |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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