Avaliação in vitro da exposição do Glucantime® em macrófagos não infectados e infectados com Leishmanis (Viannia) braziliensis, Vianna (1911)
| Autor: | Pritsch, Izanara Cristine, 1989 |
|---|---|
| Přispěvatelé: | Costa-Ribeiro, Magda Clara Vieira da, 1969, Castro, Edilene Alcântara de, 1960, Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Microbiologia, Parasitologia e Patologia |
| Jazyk: | portugalština |
| Rok vydání: | 2015 |
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| Zdroj: | Repositório Institucional da UFPR Universidade Federal do Paraná (UFPR) instacron:UFPR |
| Popis: | Orientadora: Profa. Dra. Magda Clara Vieira da Costa Ribeiro Coorientadora: Dra. Edilene Alcântara de Castro Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Microbiologia, Parasitologia e Patologia. Defesa : Curitiba, 31/03/2015 Inclui referências Área de concentração: Parasitologia Resumo: A leishmaniose tegumentar americana (LTA) é considerada um problema de saúde pública nas Américas devido a sua alta morbidade e ampla distribuição geográfica. O tratamento de primeira escolha para a LTA são os antimoniais pentavalentes (Glucantime®), no entanto, o mecanismo de ação deste fármaco ainda não está totalmente elucidado, principalmente em macrófagos infectados por Leishmania (Viannia) braziliensis. Nesse sentido, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos de Glucantime® Sb(V) (300?g/mL) sobre macrófagos peritoneais de camundongos (Swiss) não infectados e infectados com L. braziliensis. Foram analisados os seguintes experimentos: a) o índice da atividade fagocítica de macrófagos (expostos em Glucantime® por 24h utilizando Saccharomyces cerevisiae; b) a citotoxicidade por meio do teste MTT; c) a morte celular (anexina V/iodeto de propídio) e; d) a produção de espécies reativas de nitrogênio e oxigênio em macrófagos não infectados e infectados na presença de Glucantime® nos tempos de três e 24 horas. Após exposição de 24 horas ao medicamento foi observado que o mesmo aumentou a atividade fagocítica dos macrófagos. Na exposição de três horas, o Glucantime® foi citotóxico para macrófagos infectados e, em 24 horas, para macrófagos não infectados e infectados. Foi observada morte celular (característica de apoptose), no tempo de três horas, em macrófagos infectados. Os dados obtidos sobre o metabolismo oxidativo mostraram que o Glucantime® induz produção de espécies reativas após 24 horas de exposição em macrófagos não infectados. O que corrobora a elevada atividade fagocítica na presença de Saccharomyces cerevisiae nesse mesmo tempo. Os resultados deste estudo indicam que o Glucantime® não tem especificidade para macrófagos infectados, o contrário, em um tempo maior de exposição, apresentou maior efeito citotóxico para os macrófagos não infectados. Ainda, nas três primeiras horas de exposição ao medicamento, houve morte celular no macrófago, característica de apoptose. No entanto, serão necessários mais estudos para avaliar estas questões, principalmente, pelos efeitos observados sobre macrófagos não parasitados. Além disso, conhecer os eventos chaves no mecanismo de morte celular e, a citotoxicidade do antimonial pentavalente para o hospedeiro ou parasito, constituem importantes informações na busca de alvos terapêuticos para o tratamento da LTA. Palavras-chave: Leishmania (Viannia) braziliensis; Glucantime®; Macrofágos; Morte Celular; Apoptose. Abstract: The American tegumentary leishmaniasis (ATL) is considered a public health issue in the Americas due to high morbidity and wide geographic distribution. The first-line treatment for the ATL are pentavalent antimonials (Glucantime®), however, the action mechanism from this drug still is not totally elucidated, especially for macrophages infected by Leishmania (V.) braziliensis. Along these lines, the current study had as goal evaluate the effects of Glucantime® Sb(V) (300?g/mL) in mice peritoneal macrophages (Swiss) infected and non-infected by L. braziliensis. Thus, were analysed: a) the rate of phagocytic activity in macrophages (exposed under Glucantime® for 24h) using Saccharomyces cerevisiae; b) the cytotoxicity through MTT test; c) the cell death (Annexin V/propidium iodide) and; d) the production of reactive oxygen and nitrogen species within non-infected and infected macrophages in the presence of Glucantime® along periods of three and 24 hours. After 24h of drug exposure, was observed that it has increased the phagocytic activity from Leishmania-infected macrophages. In the period of three hours, Glucantime® was cytotoxic for infected macrophages and, in 24 hours, for both infected and noninfected macrophages. It has been observed characteristic cell death to apoptosis in the period of three hours for infected macrophages. The acquired data from oxidative metabolism have showed that Glucantime® induces production of reactive species after 24 hours of exposure on non-infected macrophages. This study corroborates to the high phagocytic activity when in presence of Saccharomyces cerevisiae during the same time. The results of this study also indicate that Glucantime® does not have specificity to infected macrophages, instead of it, in a higher exposure time it has showed stronger cytotoxic effect in non-infected cells. In the first three hours of treatment, there was cell death to macrophages, also characteristic from apoptosis. However further studies will be necessary to evaluate these questions, especially for the observed effects about not parasited macrophages. Furthermore, know about these key events in the cell death mechanism and the pentavalent antimonial cytotoxicity for host cells or parasite, are important information in the search of therapeutic targets for the ATL treatment. Keywords: Leishmania (Viannia) braziliensis; Glucantime®; Macrophage; Cell Death; Apoptosis. |
| Databáze: | OpenAIRE |
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