Efeitos toxicogenéticos do resveratrol em células de câncer de bexiga com diferentes status do gene TP53

Autor: Almeida, Tamires Cunha
Přispěvatelé: Silva, Glenda Nicioli da, Borges, Karina Braga Gomes, Machado, Carlos Renato, Isoldi, Mauro César, Souza, Gustavo Henrique Bianco de
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2020
Předmět:
Zdroj: Repositório Institucional da UFOP
Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)
instacron:UFOP
Popis: Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. CIPHARMA, Escola de Farmácia, Universidade Federal de Ouro Preto. A atividade antitumoral do resveratrol, composto polifenólico encontrado principalmente nas uvas, tem sido estudada em diversos tipos de câncer. No câncer de bexiga, seus efeitos antiproliferativos já foram demostrados, tanto in vitro quanto in vivo, entretanto pouco se sabe sobre seu mecanismo de ação. Nesse contexto, o presente estudo teve como objetivo avaliar o potencial antineoplásico e os possíveis mecanismos de ação molecular do resveratrol em células tumorais de bexiga com diferentes status do gene TP53 (RT4 - TP53 selvagem; 5637 e T24 - TP53 mutado). Avaliou-se os efeitos do resveratrol em relação a citotoxicidade, alterações morfológicas, sobrevivência clonogênica, genotoxicidade, mutagenicidade, produção de espécies reativas de oxigênio, progressão do ciclo celular, taxas de apoptose/necrose, migração celular, metilação global, imunocitoquímica para p53 e PCNA e expressão dos genes AKT, CDH1, CTNNBIP1, DNMT1, FGFR3, HAT, HDAC1, HOXB3, mTOR, MYC, PLK1, RASSF1A, SMAD4 e SRC. Os resultados mostraram que o resveratrol possui efeito citotóxico em todas as linhagens estudadas, sendo a linhagem TP53 selvagem mais sensível à ação desse composto. Em relação aos efeitos a longo prazo, observou-se que o resveratrol causou redução do número de colônias em todas as linhagens, juntamente com redução da expressão do gene PLK1. Aumento significativo de danos primários ao DNA foi detectado em todas as linhagens e provavelmente ocorreu devido aos efeitos pró-oxidantes do resveratrol. Aumento significativo das taxas de apoptose foram encontradas na linhagem TP53 selvagem ao mesmo tempo em que ocorreu redução da expressão dos genes AKT, mTOR e SRC. A redução da migração celular foi acompanhada pela redução da expressão do gene SMAD4 e aumento da expressão de CDH1. Além disso, os efeitos antiproliferativos do composto na linhagem TP53 selvagem foram acompanhados de modulação dos genes HAT, HOXB3 e DNMT1. Nas linhagens mutadas para o gene TP53 pode-se observar que o resveratol leva a parada do ciclo celular na fase S, juntamente com redução da expressão do gene PLK1. Também foi observada inibição da migração celular acompanhada do aumento da expressão dos genes CDH1 e CTNNBIP1. Adicionalmente, houve modulação de vias relacionadas a HOXB3, RASSF1A e HAT na linhagem T24. Concluindo, o resveratrol possui atividade antiproliferativa independente do status de TP53 em células tumorais de bexiga, entretanto, os efeitos antineoplásicos observados devem-se a diferentes mecanismos de ação. The antitumor activity of resveratrol, a polyphenolic compound found mainly in grapes, was verified in several cancers. The antiproliferative effects of resveratrol were also demonstrated in bladder cancer, however it is necessary to better understand its mechanism of action. In this context, the present study aimed to evaluate the antineoplastic potential and resveratrol molecular mechanisms of action in bladder tumor cells with different TP53 gene status (wild type RT4 - TP53; 5637 and mutated T24 - TP53). The effects of resveratrol on cytotoxicity, morphological changes, clonogenic survival, genotoxicity, mutagenicity, reactive oxygen species production, cell cycle progression, apoptosis/necrosis rates, cell migration, immunocytochemistry for p53 and PCNA, global methylation and AKT, CDH1, CTNNBIP1, DNMT1, FGFR3, HAT, HDAC1, HOXB3, mTOR, MYC, PLK1, RASSF1A, SMAD4 and SRC gene expression were evaluated. Resveratrol was cytotoxic in all cells lines studied and the TP53 wild-type cells was more sensitive to the action of this compound. Regarding long-term effects, resveratrol caused a reduction in the number of colonies in all cell lines, along with a reduction in PLK1 gene expression. Significant increase in primary DNA damage was detected in all cell lines and probably occurred due to pro-oxidant effects of resveratrol. Significant increase in apoptosis rates was found in the wild type TP53 cells and this was accompanied by AKT, mTOR and SRC downregulation. Cell migration inhibition was accompanied by SMAD4 downregulation and CDH1 upregulation. In addition, modulation of HAT, HOXB3 and DNMT1 gene expression also contributed to antiproliferative effects of resveratrol in the wild type TP53 cells. In the TP53 mutated cells, cell cycle arrest at S phase with PLK1 downregulation was observed. Cell migration inhibition was accompanied by CDH1 and CTNNBIP1 upregulation. Additionally, there was modulation of the HOXB3, RASSF1A and HAT gene expression in T24 cells, as well as nuclear PCNA reduction. In conclusion, resveratrol had antiproliferative activity in bladder tumor cells; however, the mechanisms of action are dependent on TP53 status.
Databáze: OpenAIRE
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