Complexos naturais altamente diluidos reduzem fenótipo metastático de células de melanoma murino (B16F10)

Autor: Potrich, Francine Bittencourt
Přispěvatelé: Oliveira, Carolina Camargo de, Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular, Trindade, Edvaldo da Silva
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2014
Předmět:
Zdroj: Repositório Institucional da UFPR
Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron:UFPR
Popis: Orientador : Prof. Dr. Edvaldo da Silva Trindade Co-orientadora : Profª. Drª. Carolina Camargo de Oliveira Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba, 24/02/2014 Inclui referências Área de concentração : Biologia celular molecular Resumo: O melanoma é um tipo de câncer de pele altamente metastático. Drogas quimioterápicas convencionais usadas atualmente possuem efeitos limitados, assim, terapias mais efetivas são necessárias. Este trabalho objetivou a investigação e elucidação de possíveis mudanças nas características das células de melanoma B16F10, desencadeadas pelo tratamento in vitro com os complexos naturais altamente diluídos (M1 ou M8). Para tanto, as células foram tratadas por 96 horas com M1 ou com M8 e diversos parâmetros foram analisados, enfocando possíveis alterações na expressão de mRNA de proteínas envolvidas na invasão, migração e proliferação celular; bem como avaliação de moléculas envolvidas em espécies reativas; na melanogênese e mecanismo de resistência a multidrogas. Por fim, avaliação em glicoconjugados foi realizada. Os resultados mostram claramente que o tratamento com M1 ou M8 reduz características metastáticas importantes, evidenciada, pela diminuição da expressão de metaloproteases (MT1-MMP, MMP-2 e MMP-9), e de sua atividade gelatinase; bem como da migração celular. Essa última, foi, possivelmente, decorrente do aumento de espécies reativas de oxigênio (ROS), liberação de óxido nítrico (NO) e redução de NO intracelular. Curiosamente esse efeito foi acompanhado pela redução na síntese de melanina e atividade e expressão da tirosinase (TYR), bem como da expressão gênica da TYRP-1, TYRP-2 e do MITF. Por fim, observou-se redução do mecanismo de resistência a multidrogas (transportadores ABC). Quanto aos glicoconjugados, houve uma clara redução da secreção de ácido hialurônico e da expressão gênica de hialuronidases. Ainda, foi evidente a redução da expressão gênica de proteoglicanos e de enzimas que modificam heparam sulfato. Esses resultados em conjunto sugerem que características fenotípicas metastáticas são modificadas pelo tratamento com M1 e M8, justificando os resultados anteriores encontrados in vitro e in vivo. Assim, esses complexos podem ser considerados candidatos promissores na terapia do câncer, embora estudos mais aprofundados devam ser realizados para melhor entendimento dos seus mecanismos de ação. Abstract: Melanoma is a highly metastatic skin cancer type. Conventional chemotherapy drugs currently in used are of limited value, thus more effective therapies are needed. This work aimed at investigation and elucidation of possible changes in tumor cell features triggered by highly diluted natural complex (M1 and M8) in vitro treatment using B16F10 melanoma cells. For this, cells were treated upon 96h with either M1 or M8 and several parameters were analyzed, focusing on possible changes in mRNA expression of invasion related proteins, migration and proliferation; and evaluation of reactive species; melanogenese and multidrug resistance mechanism. Finally, glycoconjugates evaluation was performed. The results clearly demonstrated that M1 and M8 treatment accounts to reduction in metastasis related features important by decreasing metaloproteases gene expression (MT1-MMP, MMP-2 and MMP-9), and your gelatinase activity, as well as cell migration. The latter was, possibly due to increased reactive oxygen (ROS), release of nitric oxide (NO) and reduction intracellular NO. Interestingly this effect was accompanied by melanin synthesis reduction and activity and expression reduction of tyrosinase (TYR), as well as TYRP-1, TYRP-2 and MITF expression. Finally, was observed reduction of drugs resistance mechanism (ABC transporters). As for glycoconjugates, there was a clear reduction in the secretion of hyaluronic acid and the gene expression of hyaluronidases. Still, it was evident the reduction of gene expression of proteoglycans and heparan sulfate enzymes modifiers. Taken together these findings suggest that metastatic phenotypic characteristics are modified by M1 and M8 treatment, justifying previous in vitro and in vivo findings. Thus these complexes can be considered as promising cancer therapy candidates, although further studies should be conducted to better understand their way of action.
Databáze: OpenAIRE
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