Estudio comparativo teórico-experimental aplicado al análisis de la expresion gênica del formas de DNA en artrópodos y células de mamíferos infectadas por el Vírus del Dengue
| Autor: | Amorim, Murilo Tavares, Ferreira, Jardel Fábio Lopes, Luna, Francisco Canindé Ferreira de, Franco Neto, Walter Félix, Melo, Karla Fabiane Lopes de, Araújo, Ana Paula Sousa, Borges, Gleissy Adriane Lima, Casseb, Samir Mansour Moraes, Cruz, Ana Cecília Ribeiro, Holanda, Gustavo Moraes |
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| Jazyk: | angličtina |
| Rok vydání: | 2020 |
| Předmět: | |
| Zdroj: | Research, Society and Development; Vol. 9 No. 11; e94191110687 Research, Society and Development; Vol. 9 Núm. 11; e94191110687 Research, Society and Development; v. 9 n. 11; e94191110687 Research, Society and Development Universidade Federal de Itajubá (UNIFEI) instacron:UNIFEI |
| ISSN: | 2525-3409 |
| Popis: | Objective: A study with a theoretical-experimental approach applied to the gene expression of DENV DNA forms in mammalian cells, compared to the presence of fragments originating from viral RNA described in the literature in arthropod cells, experimentally infected by DENV. Methodology: This is a bilateral study, of a theoretical-experimental nature, with a primary intervention basis, carried out in vitro, under a comparative technical approach. Laboratory techniques for gene expression by conventional PCR, verification procedures for analysis and literature data records were obtained and processed at the Viral Biogenesis Laboratory, linked to the Arbovirology and Hemorrhagic Fevers Sector of the Evandro Chagas Institute. Results: Experimental analysis indicated the presence of DENV-4 DNA forms in cells persistently infected by inoculation at 72 hpi. As a comparative function, C6/36 cells presented viral DNA sequences incorporated in regions of LTR retrotransposons, thus allowing to suggest that most integration events are mediated by reverse transcriptases derived from retrotransposons. Conclusion: Given the results demonstrated, it becomes evident the need for studies that characterize the ability of viral RNA to be converted into DNA forms, as well as the influence of this characteristic on the permanence of these fragments after infection, to which proteins these genes belongs, how these genes modify and interact in viral replication and the relationship of pathogenicity and tropism associated with post-mutation protein molecular plasticity, during viral replication. Objetivo: Estudio con enfoque teórico-experimental aplicado a la expresión génica de formas de DNA de DENV en células de mamífero, comparado con la presencia de fragmentos provenientes de RNA viral descritos en la literatura en células de artrópodos, infectados experimentalmente por DENV. Metodología: Se trata de un estudio bilateral, de carácter teórico-experimental, con base de intervención primaria, realizado in vitro, bajo un enfoque técnico comparado. En el Laboratorio de Biogénesis Viral, vinculado al Sector de Arbovirología y Fiebres Hemorrágicas del Instituto Evandro Chagas, se obtuvieron y procesaron técnicas de laboratorio de expresión génica por PCR convencional, procedimientos de verificación para análisis y registros de datos bibliográficos. Resultados: El análisis experimental indicó la presencia de formas de DNA de DENV-4 en células infectadas persistentemente por inoculación a 72 hpi. Como función comparativa, las células C6 / 36 presentaron secuencias de DNA viral incorporadas en regiones de retrotransposones LTR, lo que permite sugerir que la mayoría de los eventos de integración están mediados por transcriptasas inversas derivadas de retrotransposones. Conclusión: Dados los resultados demostrados, se evidencia la necesidad de estudios que caractericen la capacidad del RNA viral para convertirse en formas de DNA, así como la influencia de esta característica en la permanencia de estos fragmentos después de la infección, a qué proteínas estos genes pertenece, cómo estos genes modifican e interactúan en la replicación viral y la relación de patogenicidad y tropismo asociados con la plasticidad molecular de la proteína posmutación, durante la replicación viral. Objetivo: Estudo com abordagem teórico-experimental aplicada à expressão gênica de formas de DNA do DENV em células de mamíferos, comparada à presença de fragmentos oriundos de RNA viral descritos na literatura em células de artrópodes, experimentalmente infectadas pelo DENV. Metodologia: Trata-se de um estudo bilateral, de natureza teórico-experimental, com base na intervenção primária, realizado in vitro, sob uma abordagem técnica comparativa. Técnicas laboratoriais de expressão gênica por PCR convencional, procedimentos de verificação para análise e registros de dados da literatura foram obtidos e processados no Laboratório de Biogênese Viral, vinculado ao Setor de Arbovirologia e Febres Hemorrágicas do Instituto Evandro Chagas. Resultados: A análise experimental indicou a presença de formas de DNA de DENV-4 em células infectadas persistentemente por inoculação a 72 hpi. Como função comparativa, as células C6 / 36 apresentaram sequências de DNA viral incorporadas em regiões de retrotransposons LTR, permitindo sugerir que a maioria dos eventos de integração são mediados por transcriptases reversas derivadas de retrotransposons. Conclusão: Diante dos resultados demonstrados, fica evidente a necessidade de estudos que caracterizem a capacidade do RNA viral de ser convertido em formas de DNA, bem como a influência dessa característica na permanência desses fragmentos após a infecção, para quais proteínas esses genes pertence, como esses genes modificam e interagem na replicação viral e a relação da patogenicidade e tropismo associada à plasticidade molecular da proteína pós-mutação, durante a replicação viral. |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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