Avaliação In vitro do sêmen caprino criopreservado em diluente acrescido de superóxido dismutase e catalase em diferentes concentrações

Autor: BARROS, Maria Shírlei Rodrigues de Moraes
Přispěvatelé: GUERRA, Maria Madalena Pessoa, MAIA, Marciane da Silva, NUNES, José Ferreira, PEIXOTO, Christina Alves, CARNEIRO, Gustavo Ferrer
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2010
Předmět:
Zdroj: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPE
Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE)
instacron:UFRPE
Popis: Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-18T17:08:25Z No. of bitstreams: 1 Maria Shirlei Barros.pdf: 885582 bytes, checksum: 12e5ba4dbe4dbc6811c0b54fef726658 (MD5) Made available in DSpace on 2016-10-18T17:08:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Shirlei Barros.pdf: 885582 bytes, checksum: 12e5ba4dbe4dbc6811c0b54fef726658 (MD5) Previous issue date: 2010-02-24 Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq With the objective of to evaluate mitochondrial membrane potential (MMP), kinetic, the structural and ultrastructural of goat sperm submitted to freezing in skimmed-milk and glycerol, superoxide dismutase and catalase. It was used five bucks of Boer race, submitted to semen collect by artificial vagina. Semen samples were diluted in skimm-milk plus glycerol (7%), aiming have 320x106 sperm/mL, supplemented with antioxidants according to the experimental groups: G1) extender (control), G2) extender SOD + 25 IU/mL; G3) extender + SOD 50 IU/mL; G4) extender + SOD 100 IU/mL; G5) extender + CAT 25 IU/mL; G6) extender + CAT 50 IU/mL; G7) extender + CAT 100 IU/mL and G8) extender + SOD 100 IU/mL + CAT 25 IU/mL. Then the samples were packed in straws (0.25 mL), frozen and stored in cold storage cylinder (-196 oC). After thawing (37 ºC/30 seconds), aliquots of semen frozen/thawed of each group were evaluated to PMM, kinetic (CASA), structure and ultrastructure of spermatozoa, where did not observe significant difference (P>0.05) among experimental groups in parameters PMM, kinetic, iMP and iAc. In ultrastructural evaluation, fresh sperm was morphologically preserved mainly on mitochondrial membrane. Analyzes of thawed cells showed greater quantity of damages on acrosome; however, in lower percentage on G8 cells. G7 cells showed ultrastructural damages in acrosomes of 92.31%ofspermatozoas. In contrast, great percentage of spermatozoa have plasma and acrossomal membranes intacts, mainly on G2, G4 and G8 groups. Based on the ultrastructural results, it can be recommended addition of SOD (100 U/mL) and CAT (25 U/mL) on the freezing goat semen diluents with skimmed-milk and glycerol; as well as other studies should be realized using higher concentrations than 100U/mL of SOD in this diluent to freezing goat semen, associated to in vivo evaluation of these antioxidant action. Objetivou-se com esse estudo avaliar o potencial de membrana mitocondrial (PMM), cinética, estrutura e ultraestrutura de espermatozoides caprinos, submetidos à criopreservação com diluente à base de leite desnatado e glicerol (7%), suplementado com superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT), em diferentes concentrações. Foram utilizados cinco reprodutores caprinos da raça Boer, submetidos à colheita de sêmen com vagina artificial. As amostras de sêmen foram diluídas em leite desnatado acrescido de glicerol (7%), de forma a apresentar 320x106 espermatozoides/mL, e suplementados com antioxidantes de acordo com os grupos experimentais: G1) diluente (Controle); G2) diluente + SOD 25 U/mL; G3) diluente + SOD 50 U/mL; G4) diluente + SOD 100 U/mL; G5) diluente + CAT 25 U/mL; G6) diluente + CAT 50 U/mL; G7) diluente + CAT 100 U/mL e G8) diluente + SOD 100 U/mL + CAT 25 U/mL. Em seguida, as amostras foram acondicionadas em palhetas (0,25 mL), congeladas e armazenadas em botijão criobiológico (-196o C). Após descongelação (37 oC/30 segundos), alíquotas de sêmen de cada grupo foram avaliadas quanto a PMM, cinética (CASA), iMP, iAc e ultraestrutura (microscopia eletrônica de transmissão). Não se constatou diferença significativa (P>0,05) entre os grupos experimentais dos parâmetros PMM, iMP, iAc e cinética espermática. Na avaliação ultraestrutural, espermatozoides in natura apresentaram-se morfologicamente preservados, principalmente na membrana mitocondrial. A análise das células pós-descongelação evidenciou maior quantidade de danos no acrossoma, todavia emmenor porcentual nas células do G8. O G7 apresentou dano ultraestrutural no acrossoma de 92,31% dos espermatozoides avaliados. Em contrapartida, grande porcentagem de espermatozóides apresentaram membrana plasmática e acrossomal intactas, principalmente nos grupos G2, G4, e G8. Com base nos resultados de ultraestrutura, é possível recomendar a adição de SOD (100U/mL) e CAT (25 U/mL) ao diluente de congelação do sêmen caprino à base de leite desnatado e glicerol; assim como outros estudos devem ser realizados utilizando concentrações maiores do que 100U/mL de SOD neste diluidor de congelação de sêmen caprino, associado à avaliação in vivo da ação deste antioxidante.
Databáze: OpenAIRE
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