Use of basal cytotoxicity in vitro in reducing the number of animals tests in the evaluation of acute oral toxicity: a grandisin and its major metabolite as prototypes

Autor: VIEIRA, Marcelo de Sousa
Přispěvatelé: BOZINIS, Marize Campos Valadares
Jazyk: portugalština
Rok vydání: 2009
Předmět:
Zdroj: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG
Universidade Federal de Goiás (UFG)
instacron:UFG
Popis: A substituição ou redução do uso de animais em experimentos para a avaliação de toxicidade tem sido bastante encorajada e tem recebido grandes incentivos, inclusive financeiros, governamentais e institucionais. No entanto, a substituição completa da maioria dos testes mandatórios por agências reguladoras do setor ainda não é realidade, a exemplo, o teste de toxicidade oral aguda sistêmica. Neste contexto, se aplica a validação de testes in vitro para estimar dados in vivo. No presente trabalho, realizamos a validação in house do protocolo internacional e multilaboratorial recomendado pelo Interagency Coordinating Committee on the Validation of Alternative Methods (ICCVAM): Utilização da Citotoxicidade In Vitro na Estimativa de Doses Iniciais para Testes de Toxicidade Oral Aguda Sistêmica. Para tal, utilizamos o método de captação do corante vermelho neutro e a linhagem celular fibroblástica de camundongos BALB/c 3T3-A31. Dentre as substâncias recomendadas pelo ICCVAM para a validação do método foram investigadas 9 substâncias. A metabolização de produtos pelo organismo vivo é uma grande limitação dos testes in vitro. Utilizamos a grandisina, um tipo de ligana com grande potencial antitumoral e seu metabólito majoritário como substâncias modelos. Com utilização do metabólito conseguimos transpor esta barreira dos testes in vitro. Os resultados demonstraram que os dados obtidos estão em consonância com os dados da literatura sendo possível classificar ambas as substâncias na categoria GHS 4: grandisina e 4-Odemetilgrandisina: 617,72 mg/kg and 429,95 mg/kg, respectivamente. The animal replacement in expirements has been very encouraged by government and other institutions. However, in drugs development the animal replacement is not yet a reality, like at oral acute systemic tests. The validation of in vitro protocols is necessary for data generation with reproducibility, repetability and accuracy. In this study was validated at the Laboratório de Farmacologia e Toxicologia Celular- Faculdade de Farmácia/Universidade Federal de Goiás the protocol already validated by three laboratories (two in the USA and one at United Kingdom) and coordinated by ICCVAM: In Vitro Cytotoxicity Methods for Estimating Starting Doses for Acute Systemic Toxicity Tests, using the neutral red uptake in BAL/c 3T3-A31 cell line. It was used the grandisine, a lignan, and its major metabolite taken by fungi biodegradation. Our research group has identified a potential anti-tumoral action of grandisine, data not yet published. After in house validation we estimated the LD50 of grandisin and 4-O-demethylgrandisin: 617.72 mg/kg and 429.95 mg/kg, respectively. Both were classified under the GSH category 4.
Databáze: OpenAIRE
Externí odkaz: