Иммуногенные свойства ДНК-конструкций, содержащих структурную и неструктурную области вируса гепатита С
| Jazyk: | ruština |
|---|---|
| Rok vydání: | 2015 |
| Předmět: | |
| Zdroj: | Иммунология. |
| ISSN: | 0206-4952 |
| Popis: | Создание вакцины против гепатита С приоритетная задача современной биотехнологии и медицины. Одним из перспективных подходов является разработка ДНК-конструкций, содержащих гены вируса гепатита С (ВГС). Цель настоящей работы состояла в сравнительном анализе иммунного ответа мышей на дНК-иммунизацию плазмидой pcE1-E2, содержащей гены поверхностных белков ВГС, с иммунным ответом на плазмиду pcNS3-NS5B, включающую гены неструктурной области вируса, и оценке эффективности их совместного введения. Плазмиды вводили мышам DBA внутримышечно 3-кратно. В качестве адъюванта использовался иммуномодулятор Иммуномакс®. Гуморальный иммунный ответ оценивали по активности антител к белкам ВГС методом ИФА. Клеточный ответ изучали по пролиферации лимфоцитов в реакции бласттрансформации, по синтезу и секреции цитокинов в реакциях ELISpot и ИФА. Сравнительный анализ показал, что плазмиды pcE1-E2 и pcNS3-NS5B, введенные с адъювантом по отдельности, индуцировали сходный по интенсивности клеточный ответ, но эффективный гуморальный ответ вырабатывался только на область поверхностных белков. Иммунизация мышей смесью плазмид, кодирующих белки Е1-Е2 и NS3-NS5B ВГС, по сравнению с каждой из этих конструкций по большинству изученных параметров вызывала усиление иммунного ответа. Наблюдался кумулятивный пролиферативный ответ лимфоцитов и формирование IFN-y-секретирующих клеток как на структурную, так и неструктурную область ВГС. Показана активация синтеза антител, в том числе к эпитопам, индуцирующим антитела с вируснейтрализующими свойствами. Полученные результаты свидетельствуют о целесообразности совместной ДНК-иммунизации генами структурных и неструктурных белков ВГС для формирования эффективного иммунитета против гепатита С. Development a vaccine against hepatitis C is a priority of modern biotechnology and medicine. The construction of plasmids containing HCV genes is one of prospective approach to the creation of hepatitis C virus (HCV) vaccine. The aim was to compare immune responses of mice immunized with pcE1-E2 plasmid containing genes encoding HCV structural proteins and with pcNS3-NS5B plasmid carrying genes of HCV nonstructural proteins and to evaluate the effectiveness of immunization with both plasmids. DBA mice were immunized with the plasmids 3 times intramuscularly using the immunomodulator Immunomax® as an adjuvant. The humoral immune response was evaluated by the activity of anti-HCV antibodies in ELISA. Cellular immune response was evaluated by lymphocyte proliferation test in vitro, production and secretion of cytokines using ELISpot and ELISA. The cellular immune responses induced by pcE1-E2 or pcNS3-NS5B were similar, while effective humoral immune response was developed only to envelope proteins. Immunization with a combination of plasmids containing genes of HCV E1-E2 and NS3-NS5B proteins enhanced the immune response by the majority of parameters studied as compared with that developed after the plasmids were used individually. A cumulative lymphocyte proliferation response and formation of IFN-γ-secreting cells both to HCV structural and nonstructural proteins were observed. The activation of antibody production, including antibodies against virus-neutralizing epitopes, was recorded. The results obtained indicate the feasibility of combined immunization with plasmids containing genes of HCV structural and nonstructural proteins to generate efficient immune defense against hepatitis C. |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
|
