Сравнительный анализ иммунного ответа на ДНК-конструкции, кодирующие неструктурные белки вируса гепатита С
| Jazyk: | ruština |
|---|---|
| Rok vydání: | 2013 |
| Předmět: | |
| Zdroj: | Вопросы вирусологии. |
| ISSN: | 2411-2097 0507-4088 |
| Popis: | Перспективный подход к конструированию противовирусных вакцин состоит в активации клеточного звена иммунитета с помощью ДНК-вакцин. Цель работы изучение эффективности генетической иммунизации мышей ДНК-конструкцией pcNS3-NS5B, одновременно кодирующей 5 неструктурных белков вируса гепатита С (ВГС) NS3, NS4A, NS4B, NS5A и NS5B в сравнении с плазмидами, содержащими гены индивидуальных неструктурных белков NS3, NS4, NS5A и NS5B ВГС. Мышей линии DBA иммунизировали ДНК-конструкциями трехкратно. Гуморальный иммунный ответ оценивали в иммуноферментном анализе (ИФА), клеточный по количественному анализу уровня пролиферации Т-лимфоцитов методом проточной цитометрии и в реакции бласттрансформации лимфоцитов, по синтезу и секреции цитокинов ИФН-Y и ИЛ-2 методами ELISpot и ИФА. Установлено, что по большинству изученных параметров иммунный ответ на плазмиду pcNS3-NS5B был выше, чем на плазмиды, кодирующие отдельные белки. Так, достигнут функционально активный Т-клеточный ответ одновременно на антигены, представляющие эпитопы белков NS3, NS4, NS5A и NS5B ВГС разных генотипов. Показан высокий уровень пролиферации CD4+ -Т-клеток, секреция ИЛ-2 и ИФН-y, индукция антител изотипа IgG2a к белкам NS3 и NS5B. Полученные результаты свидетельствуют о возможности создания эффективной вакцины против гепатита С на основе ДНК-конструкции pcNS3-NS5B. A promising approach to construction of antiviral vaccines consists in activation of cellular immunity with the DNA vaccines. The goal of this work was to evaluate the efficacy of genetic immunization of mice with DNA pcNS3-NS5B encoding five hepatitis C virus (HCV) nonstructural proteins: NS3, NS4A, NS4B, NS5A, and NS5B in comparison with plasmids containing genes of same individual nonstructural proteins. The DNA constructions were injected intramuscularly in DBA mice three times. The humoral immune response was assessed with ELISA; cellular immune response in blast transformation reaction, by quantitation of CD4+ and CD8+ T cell proliferation using flow cytofluorometry, by intracellular synthesis and secretion of IFN-y and IL-2 in ELISpot and ELISA. It was found that the functionally active T cell response was achieved to antigens presenting NS3, NS4, NS5A, and NS5B epitopes of different HCV genotypes in response to pcNS3-NS5B plasmid and was stronger than that to plasmids carrying individual genes. A high proliferation rate of CD4+ Т cells, secretion of IL-2 and IFN-y, induction of anti-NS3 and anti-NS5B IgG2a were demonstrated. These findings indicate that DNA construction pcNS3-NS5B is one of promising candidates for anti-HCV vaccine developing. |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
|