Extracción del cromosoma completo del fitoplasma presente en urapanes (Fraxinus sp.), por electroforesis de campo pulsado

Autor: Mugno Ramírez, Paula Andrea, Filgueira Duarte, Juan José
Jazyk: Spanish; Castilian
Rok vydání: 2017
Předmět:
Zdroj: Revista Facultad de Ciencias Básicas; Vol. 4 No. 1-2 (2008); 84-93
Revista Facultad de Ciencias Básicas; Vol. 4 Núm. 1-2 (2008); 84-93
ISSN: 2500-5316
1900-4699
Popis: Con el fin de purificar el ADN genómico del fitoplasma que afecta a los Urapanes de Bogotá, se realizó introducción de fitoplasmas, utilizando la ectoparásita Cúscuta subinclusa, a plantas jóvenes de Urapán, a partir de árboles sintomáticos de fitoplasmosis presentes en la Universidad Militar. La presencia de fitoplasmas fue confirmada en 14 de los 16 Urapanes receptores por medio del test DAPI. Solamente el 12.5% de los Urapanes receptores fue positivo por reacción en cadena de la polimerasa (PCR), con el par de primers universales para fitoplasmas R16F2n/R16R2. El producto de PCR obtenido a partir de amplificados de ADN de urapanes receptores con los primers R16F2n/R16R2 fue secuenciado y el análisis de la secuencia mostró similaridad entre el 99% y el 100% con fitoplasmas de distintos tipos. Se realizaron ensayos de Electroforesis de Campo Pulsado (ECP), con los sintomáticos de fitoplasmosis, pero no se obtuvieron bandas a pesar de que se utilizaron grandes cantidades de tejido. Con base en los resultados obtenidos en las pruebas moleculares, se concluyó que las plantas jóvenes de Urapán no son un buen reservorio para el aislamiento de ADN genómico de fitoplasmas. Se realizó introducción de fitoplasmas a plantas de Apio a partir de los Urapanes sintomáticos de la Universidad Militar, para tratar de encontrar un nuevo reservorio para el aislamiento de ADN genómico de fitoplasmas. Los Las plantas de apio infectadas resultaron positivas por PCR con el par de primers universales para fitoplasmas PhyRNAF3.3/R16R2. En los ensayos de ECP con Apio se obtuvieron bandas de aproximadamente 1125 Kb que se purificaron y se amplificaron por PCR con los primers PhyRNAF3.3/R16R2. El producto obtenido se mandó a secuenciar y se obtuvo similaridad del 99% con secuencias de tipo "Ash Yellows", incluidas dos secuencias reportadas en 2004 por el grupo de Biotecnología Vegetal de la Universidad Militar.
Databáze: OpenAIRE
Externí odkaz: