| Popis: |
Проблематика. Хлорамфенікол (ХЛ) – антибіотик широкого спектра дії, використовується у різних галузях ветеринарії і може накопичуватись у продуктах харчування тваринного походження. Тому гранично допустиму концентрацію ХЛ у продуктах харчування істотно обмежено в країнах ЄС та США. Часто сучасні методи аналізу не дають змоги визначати слідові кількості препарату із різних матриць без попереднього концентрування. Метод рідинно-рідинної екстракції (РРЕ) може супроводжуватись втратою цільового компонента. Тому доцільно використовувати твердофазову екстракцію аналіту задля підвищення чутливості визначення інструментальними методами та забезпечення стабільності вилучення ХЛ. Мета дослідження. Розробка методики сорбційного концентрування ХЛ із проб меду з його подальшим детектуванням за допомогою імуноферментного методу. Методика реалізації. Використовували набір реагентів для визначення ХЛ імуноферментним методом “Хлорамфенікол ІФА” виробництва ТОВ “ХЕМА”. Для розробки методики твердофазового екстрагування ХЛ із проб меду використано картриджі, заповнені силікагелем (SiO2-C18) з прищепленими октадецильними групами виробництва фірми “Agilent”. Апробацію методики проводили на зразках меду, що були попередньо досліджені на наявність ХЛ за стандартною процедурою РРЕ аналіту. Результати дослідження. Досліджено можливість проведення сорбційного концентрування ХЛ на поверхні силікагелю із прищепленими октадецильними групами. Встановлено оптимальні умови вилучення аналіту на поверхні сорбенту та досліджено умови дерсорбування ХЛ з поверхні силікагелю. Методику тведофазового екстрагування ХЛ із матриць меду випробувано на контрольних матеріалах – зразках меду з відомою концентрацією ХЛ, придбаних ТОВ “ХЕМА” для проведення референсних досліджень. Висновки. Для вилучення ХЛ із матриць меду доцільно використовувати метод твердофазової екстракції. Запропонований нами метод пробопідготовки дає змогу скоротити час пробопідготовки зразків меду та є перспективним для розробки методу одночасного концентрування антибіотиків різних груп для імуноферментного дослідження. Background. Chloramphenicol (CAP) is a broad spectrum antibiotic. It’s widely used in various fields of veterinary and can be accumulated in food of animal origin. A minimum required performance limit (MRPL) for CAP in food is significantly restricted in the EU and the USA. Most modern methods make it difficult to determine the trace amounts of the drug from various matrices without concentration. The method of liquid-liquid extraction (LLE) may be accompanied by loss of trust component. It is therefore advisable to use solid phase analyte extraction to increase the determination sensitivity by instrumental methods and CL withdrawal stability. Objective. Development of the solid phase extraction method of chloramphenicol from honey, followed by enzyme linked immunoassay. Methods. Quantitative determination of chloramphenicol was determined using enzyme linked assay (ELISA) test-kit for determination of chloramphenicol in foods, provided by LLC “XEMA”. Solid phase extraction of chloramphenicol from honey samples was studied on silica gel surface modified with octadecyl groups (SiO2-C18), “Agilent”. This method of solid phase extraction was carried out on samples of honey, that previously checked by ELISA using LLE for sample preparation. Results. Our results showed the possibility of solid phase extraction of CAP on the surface of the silica gel with oktadecyl groups. The optimal conditions for extraction the analyte on the surface of sorbent were found and the eluation condition for CAP was studied. We tested the method of solid phase extraction of CAP from honey matrics on control materials — honey samples with known concentrations of CAP, that were bought by LLC “XEMA”. Conclusions. Solid phase extraction of CAP could be used for CAP extraction form honey. The proposed method of sample preparation reduces the time of preparation for honey samples. This method is perspective for developing the method of simultaneous concentration of antibiotics from different groups followed by ELISA determination. Проблематика. Хлорамфеникол (ХЛ) – антибиотик широкого спектра действия, используется в различных отраслях ветеринарии и может накапливаться в продуктах питания животного происхождения. Поэтому предельно допустимая концентрация ХЛ в продуктах питания существенно ограничена в странах ЕС и США. Часто современные методы анализа не позволяют определять следовые количества препарата из различных матриц без предварительного концентрирования. Метод жидкостно-жидкостной экстракции (ЖЖЭ) может сопровождаться потерей целевого компонента. Поэтому целесообразно использовать твердофазовую экстракцию аналита для повышения чувствительности определения инструментальными методами и обеспечения стабильности извлечения ХЛ. Цель исследования. Разработка методики сорбционного концентрирования ХЛ из проб меда с его последующим детектированием с помощью иммуноферментного метода. Методика реализации. Использовали набор реагентов для определения ХЛ иммуноферментным методом “Хлорамфеникол ИФА” производства ООО “ХЕМА”. Для разработки методики твердофазового экстрагирования ХЛ из проб меда использовали картриджи, заполненные силикагелем (SiO2-C18) с привитыми октадецильнимы группами производства фирмы “Agilent”. Апробацию методики проводили на образцах меда, которые были предварительно исследованы на наличие ХЛ по стандартной процедуре ЖЖЭ аналита. Результаты исследования. Исследована возможность проведения сорбционного концентрирования ХЛ на поверхности силикагеля с привитыми октадецильнимы группами. Установлены оптимальные условия извлечения аналита на поверхности сорбента и исследованы условия десорбции ХЛ с поверхности силикагеля. Методика твердофазового экстрагирования ХЛ из матриц меда проверена на контрольных материалах – образцах меда с известной концентрацией ХЛ, приобретенных ООО “ХЕМА” для проведения референсных исследований. Выводы. Для извлечения ХЛ из матриц меда целесообразно использовать метод твердофазовой экстракции. Предложенный нами метод пробоподготовки позволяет сократить время пробоподготовки образцов меда и является перспективным для разработки метода одновременного концентрирования антибиотиков различных групп для иммуноферментного исследования. |
