| Popis: |
Магістерська дисертація містить 75 аркушів, 14 рисунків, 20 таблиць та 67 літературних джерел. Метою роботи було здійснити хроматографічне отримання фібриногеназ отрути змій Vipera lebetina та Gloydius halys. Предмет досліджень: спосіб отримання ферментів з фібриногенолітичною активністю з отрут Vipera lebetina, Gloydius halys. Здатність отриманих ферментів щодо розщеплення фібрину у ензим-електрофорезі. Об’єкт досліджень: цільна отрута видів змій Vipera lebetina, Gloydius halys. Після виконання досліджень, вдалось підтвердити наявність ферментів з фібриногеназною активністю в отрутах Vipera lebetina та Gloydius halys. Для отрути Gloydius halys спосіб отримання фібриногенази наступний: елюювання незв’язаної фракції з цільної отрути на Blue-sepharose, розділення отриманої фракції на Q-sepharose з отриманням ферменту за концентрації солі 0,3М NaCl та подальшим очищенням даної фракції. Для отрути Vipera lebetina таким шляхом відокремити фермент з фібриногенолітичною активністю від інших ефекторів гемостазу не вдалось. Для отримання фібриногенази з отрути Vipera lebetina необхідні додаткові етапи очистки. Перевірка наявності ферментів з фібриногенолітичною активністю проводилась в тесті на визначення активованого часткового тромбопластинового часу. Виявлено фракції в отруті Gloydius halys, які подовжували час зсідання плазми крові. Фракція, яка не зв’язується з сорбентом Blue-sepharose, подовжує час зсідання крові у 1,6 разів (в порівнянні з контролем). Після розділення незв’язаної фракції на Q-sepharose, фракція, що елюювалась за концентрації солі 0,3М NaCl, виявляла подовження часу зсідання плазми у 1,9 разів (у порівнянні з контролем). Фракції з отрути Vipera lebetina, які отримали після розділення на Q-sepharose, не подовжували час зсідання плазми крові. Проведення ензим-електрофорезу підтвердило наявність ферменту з фібриногенолітичною активністю у обох отрутах видів Vipera lebetina, Gloydius halys. Молекулярна маса ензиму склала близько 30 кДа. Розроблено стартап-проект отримання фібриногенази з отрути Gloydius halys шляхом хроматографічного розділення. Технологію можна використовувати для отримання фібриногенази та її подальшого вивчення. Перспективним є створення ліків на основі фібриногенази з отрути Gloydius halys для лікування тромбозу. Робота виконувалась у Відділі структури та функції білку Інституту біохімії ім. О.В Палладіна Національної академії наук України. Під керівництвом наукового співробітника Відділу структури та функції білка, Інститут біохімії ім.О.В.Палладіна, к. б. н. Грищука Володимира Івановича. Висловлюється подяка Грищуку В. І. за допомогу у виконанні досліджень, обробці результатів та оформленні магістерської дисертації. |
