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Esta investigación tuvo como objetivo conservar a la especie Caucaea pichinchae, mediante el desarrollo de técnicas de cultivo in vitro, con el fin de disponer de material genético necesario para su estudio y comercialización. La colecta del material vegetal se realizó en el mes de marzo en las faldas del volcán el Corazón del cantón Mejía en el bosque protector Umbría, utilizando cápsulas maduras, empleando la técnica de tetrazolio cuya prueba de viabilidad fue de 96,5%, posteriormente se realizó la preparación de los tres medios de cultivo: M1: Medio Knudson plus; M2: Medio Vacin and Went; M3: Lindeman, manteniendo un pH de 5,8 para favorecer la posterior absorción de nutrientes, en cuanto a la preparación de giberelinas se emplearon tres concentraciones de 0,05, 0,1 y 0,2 mg/L, a partir de una solución madre de 1 ppm. Para la desinfección de las semillas, se empleó una jeringa de 10 mL con un trozo de algodón que retenía las semillas, con una solución de hipoclorito al 3% suplementada con dos gotas de tween, luego se las enjuagó con agua destilada, posterior a esto se inoculó sobre los medios de cultivo dos gotas por tubo de ensayo, dispersando uniformemente para que cubran bien la superficie, el proceso se realizó dentro de la cámara de flujo laminar bajo condiciones asépticas. Los resultados mostraron que el medio de cultivo M2 con la concentración de giberelinas (GA3) al 0,1 mg/L, presentó un mayor número de protocormos, por lo cual se pudo concluir que esta fitohormona incrementa la cantidad de protocormos al inducir la división celular a una baja concentración, y que el medio Vacin and Went puede ser empleado para obtener un mayor porcentaje de protocormos de la especie, en conjunto con un fotoperiodo de 16 horas luz y 8 de obscuridad. This research aimed to conserve the Caucaea pichinchae species, through the development of in vitro culture techniques, in order to have the genetic material necessary for its study and commercialization. The plant material was collected in march on the slopes of the Corazón volcano in the Mejía canton in the Umbría protective forest, using mature capsules, employing the tetrazolium technique whose viability test was 96.5%, later prepared the three culture media: M1: Knudson plus medium; M2: Middle Vacin and Went; M3: Lindeman, maintaining a pH of 5,8 to favor the subsequent absorption of nutrients, in terms of the preparation of gibberellins, three concentrations of 0,05, 0,1 and 0,2 mg/L were used, from a 1 ppm stock solution. For the disinfection of the seeds, a 10 mL syringe was used with a piece of cotton that retained the seeds, with a 3% hypochlorite solution supplemented with two drops of tween, then they were rinsed with distilled water, after these two drops per test tube were inoculated on the culture media, dispersing uniformly so that they cover the surface well, the process was carried out inside the laminar flow chamber under aseptic conditions. The results showed that the M2 culture medium with the concentration of gibberellins (GA3) at 0,1 mg/L, presented a greater number of protocorms, for which it was possible to conclude that this phytohormone increases the amount of protocorms by inducing cell division at a higher rate. low concentration, and that the Vacin and Went medium can be used to obtain a higher percentage of protocorms of the species, together with a photoperiod of 16 hours of light and 8 hours of darkness. |
