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Este trabalho divide-se em dois pontos importantes: implementação e validação de técnicas inovadoras para avaliação da viabilidade espermática de garanhões.Congelar sémen epididimal consiste num método eficaz e prático para preservar material genético. O epidídimo, sendo um reservatório de sémen, abre uma possibilidade de aplicações práticas.A comercialização de sémen refrigerado tem vindo a aumentar de forma significativa, portanto, todos os aspetos relacionados com esta, nomeadamente novas formas de avaliar a viabilidade celular de sémen refrigerado, são de extremo interesse científico. O PrestoBlue é considerado um reagente de ação rápida e foi o reagente escolhido para este ensaio.Na viabilidade foram testados seis Puros Sangue Lusitanos de idades distintas e apenas dois Warmblood, procedendo à recolha de sémen com vagina artificial e posterior avaliação.O sémen obtido da cauda do epidídimo após a orquiectomia física, submetido à congelação, apresentou características de motilidade semelhante ao sémen obtido por recolha de sémen. O sémen congelado após tratamento de castração química, apresentou características de motilidade semelhantes ao sémen de garanhões que não sofreram castração química, apesar de se terem verificado alterações físicas resultantes do mesmo. O PrestoBlue apresenta-se como um reagente fiável para futuros estudos de viabilidade espermática em condições de refrigeração. This work was divided into two important points: implementation and validation of innovative techniques for evaluating sperm viability.Freezing epididymal semen is an effective and practical method to preserve genetic material. The epididymis, being a reservoir of semen, opens up a possibility of practical applications.The commercialization of refrigerated semen has been increasing significantly, therefore, all aspects related to it, namely new ways to assess the cell viability of refrigerated semen, are of extreme scientific interest. PrestoBlue is considered a fast- acting reagent and was the reagent of choice for this assay.In terms of viability, six Puro Sangue Lusitano of different ages and only two Warmblood were tested, proceeding to the collection of semen with an artificial vagina and subsequent evaluation.The semen obtained from the tail of the epididymis after physical orchiectomy, submitted to freezing, showed similar motility characteristics to the semen obtained by semen collection. The frozen semen after chemical castration treatment presented motility characteristics similar to the semen of stallions that did not undergo chemical castration, despite the physical alterations resulting from it. PrestoBlue presents itself as a reliable reagent for future sperm viability studies under refrigerated conditions. |
