| Popis: |
Traballo Fin de Grao en Veterinaria. Curso 2016-2017 [GA] O xénero Salmonella encontrase mundialmente estendido e representa un problema importante de saúde pública ó ser un dos principais patóxenos que produce enfermidades por consumo de alimentos. A capacidade de este xénero para formar biofilms favorece a súa prevalencia e a súa capacidade de avanzar o longo da cadea alimentaria, dende a granxa a mesa. Diversos estudos observaron que a capacidade de formación de biofilms varía en función da cepa de Salmonella avaliada. Polo tanto, o obxectivo deste traballo foi avaliar en once cepas pertencentes a cinco serotipos diferentes de Salmonella enterica e unha cepa de Salmonella enterica subsp. salamae a formación de biofilms en varios medios de cultivo, temperaturas e superficies. Así mesmo, avaliouse o morfotipo e a motilidade das doce cepas de Salmonella spp. Tamén relacionouse a expresión xénica e de ARNs coa formación de biofilms de tales cepas. A motilidade nas diferentes temperaturas avaliadas só mostra diferencias significativas entre 22, 30 e 37 ⁰C con 6 ⁰C. En cambio, o morfotipo foi diferente nas catro temperaturas avaliadas e a 22 ⁰C todas as cepas presentaban o morfotipo RDAR (Red, dry and rough), que está intimamente relacionado ca formación de biofilms. O conservante alimentario que máis diminuíu a formación de biofilms e o acetato sódico, inhibindo a formación de biofilms de tódalas cepas en aceiro inoxidable, mentres que cos medios suplementados con nitritos e sulfitos, en ambas superficies se formaron máis o igual cantidade de biofilms que nos residuos alimentarios. Isto relacionouse coa curva de crecemento na cal o acetato sódico retrasaba o comezo da fase exponencial e os nitritos e os sulfitos mostraban maior crecemento cos residuos alimentarios. A expresión xénica variou dependendo da cepa e do medio de cultivo avaliado exceptuando o xene csgD que estivo infraexpresado en tódolos casos en comparación co medio de cultivo de referencia 1/20 TSB. Os xenes de virulencia correlacionáronse positivamente cos xenes relacionados coa formación de biofilms, excepto no exsudado de polo no que a correlación foi negativa. Os resultados deste traballo indican ca formación de biofilms e a expresión xénica varían dependendo da cepa, da temperatura, da superficie e do medio de cultivo avaliado. Tamén resalta a falta de eficacia dos conservantes máis comunmente empregados o que pode supoñer un problema de saúde publica. Son necesarios mais estudos avaliando diferentes reguladores da formación de biofilms para obter unha visión máis completa do mecanismo de formación de biofilms na industria alimentaria [ES] El género Salmonella se encuentra extendido mundialmente y representa un problema importante de salud pública al ser uno de los principales patógenos que produce enfermedades por consumo de alimentos. La capacidad de este género para formar biofilms favorece su prevalencia y su capacidad de avanzar a lo largo de la cadena alimentaria, desde la granja al consumidor. Diversos estudios han observado que la capacidad de formación de biofilms varía en función de la cepa de Salmonella evaluada y de las condiciones ambientales. Por tanto, el objetivo de este trabajo fue evaluar en once cepas pertenecientes a cinco serotipos diferentes de Salmonella enterica y una cepa de Salmonella enterica subsp. salamae la formación de biofilms en varios medios de cultivo, temperaturas y superficies. Así mismo, se evaluó el morfotipo y la motilidad de las doce cepas de Salmonella spp. También se relacionó la expresión génica y de ARNs con la formación de biofilms de dichas cepas. La motilidad en las diferentes temperaturas evaluadas solo muestra diferencias significativas entre 22, 30 y 37 ⁰C con 6⁰C. En cambio, el morfotipo fue diferente en las cuatro temperaturas evaluadas y a 22 ⁰C todas las cepas presentaban el morfotipo RDAR (Red, dry and rough), que está íntimamente relacionado con la formación de biofilms. El conservante alimentario que más disminuyó la formación de biofilms fue el acetato sódico, inhibiendo la formación de biofilms de todas las cepas en acero inoxidable mientras que, en los medios suplementados con nitritos y sulfitos, en ambas superficies se formaron más o igual cantidad de biofilms que en los residuos alimentarios. Esto se relacionó con la curva de crecimiento en la cual el acetato sódico retrasaba el comienzo de la fase exponencial y los nitritos y los sulfitos mostraban mayor crecimiento que los residuos alimentarios. La expresión génica varió dependiendo de la cepa y del medio de cultivo evaluado exceptuando el gen csgD que estuvo infraexpresado en todos los casos en comparación con el medio de cultivo de referencia 1/20 TSB. Los genes de virulencia se correlacionaron positivamente con los genes relacionados con la formación de biofilms, excepto en el exudado de pollo en el que la correlación era negativa. Los resultados obtenidos en este trabajo indican que la formación de biofilms y la expresión génica variaron dependiendo de la cepa, la temperatura, la superficie y el medio de cultivo evaluado. También resalta la falta de eficacia de los conservantes más comúnmente utilizados lo que puede suponer un problema de salud pública. Son necesarios más estudios evaluando diferentes reguladores de la formación de biofilms para obtener una visión más completa del mecanismo de formación de biofilms en la industria alimentaria. [EN] Salmonella spp. is a worldwide food-borne pathogen and represents a major concern in public health. The capacity of this microorganism to produce biofilms favors its prevalence and the ability to progress through the food chain, from the farm to de consumer. Many studies have observed that the capacity of Salmonella to form biofilms varies depending on the strain and the environmental conditions. Thus, the aim of this study was to evaluate the biofilm formation ability in different growth mediums, temperatures and surfaces of eleven different strains from five distinct Salmonella enterica serotypes and one strain from Salmonella enterica subsp. salamae. Furthermore, morphotype and motility of the twelve strains was evaluated. Gene and sRNA expression was also evaluated in relation with biofilm formation. Motility of the twelve strains only showed significant differences between 6 ⁰C and 22, 30 and 37 ⁰C. However, morphotype varied according with the temperature evaluated and all the strains showed the RDAR (Red, dry and rough) morphotype at 22 ⁰C which is closely related with biofilm formation. Within the food preservatives, sodium acetate inhibited biofilm formation in stainless steel where none of the strains formed biofilm. Growth media supplemented with nitrites and sulfites caused higher biofilm formation than food residues. These results were related with those results found in the growths curves. Salmonella strains growth in sodium acetate began the exponential phase later than the other food preservatives evaluated. Also, nitrites and sulfites showed more growth than food residues. Gene expression varied depending on the strain and the growth media except in the case of csgD that was down-expressed in each growth medium tested in comparison with the reference media 1/20 TSB. Virulence genes showed a positive correlation with biofilm related genes except in chicken juice in which the correlation was negative. The results obtained in this study showed that biofilm formation and gene expression is strain, temperature, surface and growth media dependent. Also, this study highlights the lack of effectiveness of commonly used food preservatives that may represent a public health problem. More studies evaluating different biofilm major regulators are necessary for gaining a fuller picture of biofilm formation mechanism in food industry. |
