| Autor: |
Kučerová, Jana, Holubová, Lucie, Jankovičová, Barbora, Dvořáková, Veronika, Moťková, Petra, Bílková, Zuzana |
| Jazyk: |
angličtina |
| Rok vydání: |
2013 |
| Předmět: |
|
| Popis: |
The selection of antibodies with the desired specificity, immunoreactivity, purity and integrity is a key step in developing an effective immunosorbent for immunomagnetic separation (IMS). The choice of methods for characterizing the antibodies is limited, especially with antibodies specific to surface cell structures. In this study, four commercial anti-Salmonella antibodies were evaluated from the point of view of their immunoreactivity with the cells of Salmonella Typhimurium and of their purity. For these purposes, traditional SDS-PAGE analysis with subsequent silver staining and a newly adapted whole-cell dot blot technique were applied. Based on this testing, monoclonal anti-core LPS Salmonella antibodies from MyBiosource unambiguously demonstrated the highest immunoreactivity to Salmonella Typhimurium cells, whereas cross-reactivity with the closely related G- bacteria, Escherichia coli and Citrobacter braakii was not observed. Such antibodies will be subsequently used for the preparation of an anti-Salmonella immunosorbent and applied in IMS. The immunoreactivity and selectivity of anti-Salmonella poly- and monoclonal antibodies are also discussed. Klíčovým krokem při přípravě imunosorbentu pro efektivní imunomagnetickou separaci buněk je výběr protilátek s požadovanou specifitou, imunoreaktivitou a čistotou. Jejich charakterizace z pohledu těchto vlastností je obtížná, zejména pokud se jedná o protilátky proti povrchových buněčným strukturám. Tato studie se zabývá kvalitativním hodnocení čtyř komerčně dostupných anti-salmonelových protilátek z pohledu jejich čistoty a imunoreaktivity na buňky bakterie Salmonella Typhimurium. Ke kvalitativní analýze vybraných protilátek byla použita tradiční metoda SDS-PAGE a nově adaptovaná dot-blot technika pro celé buňky. Výsledky této studie ukazují nejvyšší imunoreaktivitu monoklonálních anti-Salmonella protilátek od firmy MyBiosource. Zkřížená reaktivita s G- bakteriemi Escherichia coli a Citrobacter braakii nebyla pozorována. |
| Databáze: |
OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
|
