| Autor: |
Corrêa, F, Borlone, C, Wittwer, F, Bustamante, H, Müller, A, Ramírez, A, Menarim, B |
| Jazyk: |
angličtina |
| Rok vydání: |
2014 |
| Předmět: |
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| Zdroj: |
Archivos de medicina veterinaria, Volume: 46, Issue: 3, Pages: 471-476, Published: 2014 |
| Popis: |
Musculoskeletal injuries in horses are very frequent and lead to substantial financial losses. Bone marrow mononuclear cells (BMMNCs), the fraction of bone marrow containing mesenchymal stem cells, have been successfully employed to enhance healing of tendon, ligament and articular injuries in this specie. Many descriptions of how to harvest equine BM and isolate BMMNCs have been described; however, reported protocols consider fully equipped and costly laboratory facilities. The aim of this manuscript is to demonstrate to veterinary practitioners that obtaining and effective isolating equine BMMNCs for clinical use is possible with basic laboratory equipment. BM samples of 10 horses were collected from the 5th sternebra into 60 mL syringes containing heparin and Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline (DPBS) using equipment that can be found in most equine clinics. Further, samples were centrifuged by density gradient for BMMNCs isolation within 1h after collection. Concentration and cell viability was determined by both direct counting on a Neubauer® chamber and epifluorescence analysis. Harvesting and isolation was achieved for all horses with no restrictions. The final 1 mL concentrate considered total number of BMMNCs (mean ± SD) and percentage of cell viability amongst isolates were 190±54 x 10(6) and 98±1.2%, respectively. Contamination was not observed in obtained samples and horses treated with BMMNCs using this technique did not present any clinical complications. Aspiration and processing of equine sternal BM using the described technique is a low cost and reliable method to obtain BMMNCs for cell based therapies. Las lesiones musculoesqueléticas en caballos son frecuentes y conllevan a pérdidas económicas substanciales. La fracción de células mononucleares originadas de la médula ósea, porción que contiene células troncomesenquimales, ha sido aplicada exitosamente para mejorar la reparación de lesiones musculoesqueléticas en esta especie. Diversos reportes sobre cómo obtener y aislar productos de origen medular han sido descritos; sin embargo, esos consideran la utilización de laboratorios altamente equipados. El objetivo del presente manuscrito es demostrar a médicos veterinarios que obtener y aislar células mononucleares de medula ósea esternal para uso clínico es posible mediante equipos básicos de laboratorio. Muestras de médula ósea de 10 caballos fueron obtenidas a partir de la 5ª esternebra en jeringas de 60 mL conteniendo heparina y DPBS. Las muestras fueron procesadas dentro de 1 h posterior a la recolección usando instrumentos habitualmente encontrados en la mayoría de las clínicas equinas. Luego del aislamiento de la fracción mononuclear, la concentración y viabilidad celular de esta fueron determinadas por recuento en cámara de Neubauer®. El concentrado final de 1 mL presentó concentración de células mononucleares (media ± DE) y un porcentaje de viabilidad de 190±54 x 10(6) y 98±1,2%, respectivamente. No se observó contaminación en las muestras obtenidas y los caballos tratados con el concentrado medular usando esta técnica no presentaron complicaciones clínicas. La aspiración y el procesamiento de médula ósea esternal equina usando la técnica descrita es un método de bajo costo y seguro para obtener células mononucleares para terapias celulares. |
| Databáze: |
OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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