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Im Rahmen der Dissertation wurde ein Real Time (RT) Multiplex PCR Assay zum quantitativen Nachweis von Alternaria Spezies sowie Phoma betae an Zuckerrübensaatgut entwickelt. Des Weiteren wurde ein RT Multiplex PCR Assay zum Nachweis von Fusarium Spezies an Braumalz validiert. Zudem wurde ein Isolierungs- und Aufreinigungsverfahren für die DNA des untersuchten Probenmaterials entwickelt. Unter Verwendung dieser Methodik sowie dem Assay zum Nachweis und zur Differenzierung von Fusarium Spezies wurden 273 Gersten- und Weizenmalzproben analysiert. Die Messwerte wurden anschließend mit dem Gushingverhalten sowie dem Mykotoxingehalt der Malzprobe verglichen. Ein direkter Zusammenhang zwischen Fusarium Belastung und Gushingverhalten konnte nicht festgestellt werden. Hingegen wurde beobachtet, dass ab einem bestimmten Belastungsindex die DON Konzentration der jeweiligen Probe signifikant ansteigt. Damit eignet sich das Verfahren für ein schnelles Screening von Malzmustern, um potentiell hoch mykotoxinbelastete Chargen zu identifizieren. Within the framework of this thesis, a Real Time (RT) multiplex PCR assay for the quantitative detection of Alternaria species and Phoma betae on sugar beet seed was developed. Furthermore, a RT multiplex PCR assay for detection of Fusarium species on malt was validated. In addition, an isolation and purification procedure for the DNA of the investigated sample material was developed. Using this methodology in combination with the assay for the detection and differentiation of Fusarium species on 273 barley and wheat malt samples were analyzed. The measured values were then compared with the gushing tendency and mycotoxin level of the malt sample. A direct relationship between gushing tendency and Fusarium contamination could not be found. By contrast, it was observed that beyond a certain load index, the DON concentration of the sample increases significantly. Therefore this method is suitable for rapid screening of malt samples in order to identify potentially high mycotoxin contaminated batches. |
