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Con la finalidad de preparer frotis de antígeno para la realización de la técnica de Inmunofluorescencia Indirecta (IFI), un perro sano esplenectomizado fue inoculado con plasma rico en plaquetas (PRP), el cual contenía una cepa de E. platys y otro perro sin esplenectomizar se infecto en forma natural mediante picadura de garrapatas. Se modificó la técnica descrita por French y Harvey para la preparación del antígeno de E. platys y se obtuvieron frotis antígenos de excelente calidad. Se realizaron contajes plaquetarios, valoración de parasimetemias y títulos de anticuerpos anti-E platys fueron 1:1600, estos títulos disminuían parcial o totalmente al aplicar tratamiento con Doxiciclina. Para la estandarización de la prueba se usaron, además de los sueros de los perros experimentales, 30 sueros de perros de la ciudad de Maracaibo positivos y negativos a E. platys en frotis de capa blanca. Diez y siete de ellos fueron negativos a IFI y trece positivos. Se utilizó el antígeno para evaluar el lote de 30 sueros humanos, a los cuales se les había observado Ehrlichias plaquetarias semejantes a E. platys; todos resultaron negativos concluyéndose que no existe reacción cruzada entre ellas. Así mismo, se demostró la presencia de Ehrlichia platys en las plaquetas del PRP de perro usando la técnica de microscopia de transmisión. In order to prepare antigen slides to perform the indirect fluorecent antibody test (IFA), a healthy splenectomized dog was inoculated I.V. with platelet rich plasma (PRP), containing as strain of E. platys. Another dog without splenectomy was naturally infected trough tick’s bite. The French and Harvery’s technic for E. platys antigen slides was modificated and excellent quality antigen slides were obtained. Platelet counts, parasitemia and anti-E. platys antibodies titles every seven days during the study (3,5 a 3 months respectively) were perform. The highest title obtained was 1:1600; title decrease partially or totally after Doxicicline treatment. Serum samples from the two experimental dogs and from 30 dogs from Maracaibo’s city (negative and positive by buffy coat smears) were used to standarize the test. Seventeen of the serum samples were negatives to IFA test and thirteen were positives Antigen was used to test a group of 30 serum samples from humans that showed plaquetary Ehrlichia similar to E. platys. All of them were negatives and then there is not a cross reactivity between them. Ehrlichia platy in platelets from de dog PRP was demostrated using transmission electron microscopy technic. 99 - 110 Cuatrimestral |
