| Popis: |
Quil A is de naam voor een saponinemengsel dat gewonnen wordt uit de bast van de Quillaja Saponaria Molina. In een concentratie van 0,3 of meer g/l vormen deze saponines micellen, die de basis vormen voor "immunostimulating complexes" (iscoms). In dit rapport wordt het onderzoek beschreven dat gedaan werd voor de ontwikkeling van een analytisch-chemische methode om de verschillende componenten van het Quil A preparaat "Spikoside" te scheiden en te kwantificeren. Dit gebeurde ten behoeve van een onderzoek naar de immunogene en toxische eigenschappen van iscoms. Er werd een hogedruk-vloeistof-chromatografische (HPLC) methode met gradientelutie ontwikkeld, waarmee de belangrijkste componenten van het Spikoside werden gescheiden en waarbij de chromatografische pieken werden geintegreerd. Tevens werd op een semi-preparatieve kolom 1 mg Spikoside gescheiden, het eluens werd in gelijke fracties opgevangen en de fracties werden op hemolytische activiteit getest. Hierbij bleek dat 90% van de hemolytische activiteit wordt veroorzaakt door de groep pieken die in het laatste deel van de gradient elueert. Deze semi-preparatieve scheiding werd enige malen herhaald, de drie belangrijkste pieken werden afzonderlijk opgevangen en de eluaten werden gevriesdroogd ten behoeve van een morfologisch en chemisch onderzoek van iscomstructuren op de afdeling Geinactiveerde Virus Vaccins. |
