Construcción de un vector de expresión derivado de virus adenoasociados para corregir in vitro el defecto genético de la enfermedad de Morquio A
| Autor: | Felipe García-Vallejo, Mónica A Gutiérrez, Luis A. Barrera, Carlos J. Alméciga-Díaz, Flavio Cerón, Martha C. Domínguez, Shunji Tomatsu |
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| Jazyk: | angličtina |
| Rok vydání: | 2008 |
| Předmět: |
lcsh:Arctic medicine. Tropical medicine
lcsh:RC955-962 lcsh:R lcsh:Medicine Biology gene transfer techniques culture techniques Molecular biology Mucopolysaccharidosis IV [genetics] gene therapy General Biochemistry Genetics and Molecular Biology Genetic therapy Dependovirus virus cultivation dependovirus |
| Zdroj: | Biomédica: revista del Instituto Nacional de Salud, Vol 28, Iss 3, Pp 448-459 (2008) |
| ISSN: | 0120-4157 |
| Popis: | Introduccion. La mucopolisacaridosis IV A (Morquio A) es una enfermedad de deposito lisosomico causada por la deficiencia en la actividad de la enzima N-acetil-galactosamina- 6-sulfato-sulfatasa que produce la acumulacion intralisosomica de queratan y condroitin-6-sulfato. Hasta el momento, su manejo es paliativo, por lo que las investigaciones se han enfocado en establecer una terapia que pueda aplicarse tempranamente y garantice la expresion estable de la enzima. En este sentido, la terapia genica se presenta como una de las potenciales alternativas terapeuticas para corregir el defecto genetico en la mucopolisacaridosis IV A. Objetivo. Construir vectores de expresion derivados de virus adenoasociados para corregir in vitro la deficiencia enzimatica en la mucopolisacaridosis IV A. Materiales y metodos. Se produjeron vectores derivados de virus adenoasociados que portaban el gen humano de la enzima N-acetil-galactosamina-6-sulfato-sulfatasa dirigido por el promotor temprano del citomegalovirus humano, empleando un sistema libre de adenovirus. Se transfectaron celulas HEK293 y fibroblastos humanos Morquio A con los virus recombinantes, y se determino la actividad enzimatica en el lisado celular a las 24 y 48 horas despues de la transfeccion. Resultados. Se obtuvieron virus adenoasociados recombinantes, libres de adenovirus, con titulos hasta de 2,08 x 1010 capsides/ml. Tanto en celulas HEK293 como en fibroblastos Morquio A transfectados, se obtuvieron actividades enzimaticas hasta de 3,05 nmoles/mg por hora, 48 horas despues de la transfeccion. Conclusion. Los virus recombinantes producidos expresaron in vitro la enzima GALNS en las celulas transfectadas. Estos resultados constituyen el paso inicial para el desarrollo de una terapia genica para la enfermedad de Morquio A empleando vectores derivados de virus adenoasociados. |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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