Effect of retinoic acid on expression of receptor ccr9 and alpha 4 beta 7 integrin in alpaca blood leukocytes (Vicugna pacos)

Autor: C Nieves Sandoval, C Eduardo Hermoza, Gina Castro S, C Danilo Pezo, S Alberto Manchego
Jazyk: Spanish; Castilian
Rok vydání: 2018
Předmět:
Zdroj: Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú; Vol 29 No 1 (2018); 349-361
Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú; Vol. 29 Núm. 1 (2018); 349-361
ISSN: 1609-9117
1682-3419
Popis: Las células T efectoras (CD4+ y CD8+) y de memoria pueden migrar a la mayoría de los tejidos extra-linfoides en el cuerpo, pero requieren la expresión de receptores de alojamiento (homing) específicos en las células T, la integrina A4B7 y el receptor de quimiocina CCR9. Los linfocitos circulantes CD4+ o CD8+ carecen de receptores CCR9 y A4B7; sin embargo, expresan este tipo de receptores al alcanzar la mucosa intestinal. El objetivo del estudio fue determinar el efecto del ácido retinoico sobre la expresión de los receptores CCR9 y la integrina A4B7análisis in vitro de muestra de sangre circulante de alpaca. Los leucocitos obtenidos se colocaron en placas de cultivo celular en medio esencial mínimo (MEM) suplementados e inoculados con ácido retinoico a concentraciones de 10, 50 y 100 ug/ml disuelto en DMSO. Se empleó un control a base de suero fisiológico. Las placas de cultivo celular fueron incubadas por 12, 24 y 48 h a 37 ºC con CO2 al 5%. Se realizó las PCR en Tiempo Real de los ARNm del receptor CCR9 y la integrina A4B7 y la cuantificación relativa con el método 2-ÄÄCt. Las máximas expresiones para CCR9 se dieron a las 48 h para las concentraciones de 10 y 100 ug/ml de ácido retinoico y DMSO, y a las 24 h para la concentración de 50 ug/ml. El control presentó expresiones mucho más elevadas en comparación con las dosis de ácido retinoico y DMSO. No hubo expresión para la integrina A4B7.
Effector T cells (CD4+ and CD8+) and memory cells can migrate to most extra lymphoid tissues in the body, but require the expression of specific homing receptors in T cells, α4β7 integrin and receptor chemokine CCR9. CD4+ or CD8+ circulating lymphocytes lack CCR9 and α4β7 receptors; however, these receptors are expressed upon reaching the intestinal mucosa. The aim of the study was to determine the effect of retinoic acid on the expression of CCR9 receptors and α4β7 integrin on alpaca lymphocytes (Vicugna pacos). An in vitro analysis of circulating alpaca blood sample was performed. The obtained leukocytes were placed in cell culture plates in minimal essential medium (MEM) supplemented with retinoic acid at concentrations of 10, 50 and 100 ìg/ml dissolved in DMSO. A control based on physiological serum was used. Cell culture plates were incubated for 12, 24 and 48 h at 37 °C with 5% CO2. Real-time PCR of the CCR9 receptor mRNA and α4β7 integrin and relative quantification with the 2-ΔΔCt method were performed. The maximum expressions for CCR9 were given at 48 h for concentrations of 10 and 100 μg/ml of retinoic acid and DMSO, and at 24 h for the concentration of 50 μg/ml. The control had much higher expressions compared to the doses of retinoic acid and DMSO. There was no expression for the α4β7 integrin.
Databáze: OpenAIRE
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