[Comparative characteristics of enzymatic hydrolysis methods for isolating toxic substances from blood and hair]

Autor: Yu V Slustovskaya, O Yu Strelova, V. N. Kuklin, M K Starovoitova, A S Minachenkova, M V Krys'ko
Rok vydání: 2020
Předmět:
Zdroj: Sudebno-meditsinskaia ekspertiza. 63(3)
ISSN: 0039-4521
Popis: The aim of study was to develop methods for the hydrolysis with hyaluronidases for the isolation of drugs (phenobarbital, diphenhydramine hydrochloride and phenibut) from biological objects (blood, hair) and to compare their effectivenes with previously developed methods of enzymatic hydrolysis. The studies were carried out using model «blood - model drug substance (MDS)», a natural and artificially colored wool (hair) of laboratory animals - guinea pigs of white, red and black natural colors, which were daily given a solution of MDS and then were subjected to cosmetic effects - coloring. The isolation of MDS from the model complex «blood - MDS» and from wool was carried out using the developed methods of hydrolysis with proteolytic enzymes (papain, chymopsin and chymotrypsin) and hyaluronidase. Phenobarbital and diphenhydramine from hydrolysates were extracted by liquid-liquid extraction method, phenibut - by direct freezing extraction with acetonitrile. The analysis of the extracts was carried out by gas chromatography with mass selective detection. The results showed that the developed methods of enzymatic hydrolysis can be recommended for isolating substances of various properties (acidic, amphoteric and alkaline) from blood, natural and artificially colored wool (hair).Разработка методики гидролиза гиалуронидазой с целью изолирования лекарственных веществ (фенобарбитал, дифенгидрамина гидрохлорид и фенибут) из биологических объектов (кровь, волосы) и сравнение ее эффективности с известными методиками ферментативного гидролиза. Использовали смесь кровь — модельное лекарственное вещество (МЛВ), природно и искусственно окрашенную шерсть лабораторных животных — морских свинок белого, рыжего и черного природного окраса, которые ежедневно перорально получали раствор МЛВ и затем подвергались косметическому воздействию — окрашиванию. Изолирование МЛВ из комплекса кровь — МВЛ и шерсти проводили по разработанным методикам гидролиза протеолитическими ферментами (папаин, химопсин и химотрипсин) и гиалуронидазой. Фенобарбитал и дифенгидрамин из гидролизатов экстрагировали методом жидкость-жидкостной экстракции, фенибут — методом прямого экстракционного вымораживания с ацетонитрилом. Анализ полученных извлечений проводили методом газовой хроматографии с масс-селективным детектированием. Разработанные методики ферментативного гидролиза можно рекомендовать для проведения изолирования веществ различной природы (кислого, амфотерного и щелочного характера) из крови, шерсти (волосы) природного и искусственного окраса.
Databáze: OpenAIRE