Seminal plasma interference in the kinetics and viability of cryopreserved canine sperm

Autor: André Maciel Crespilho, Maria Isabel Mello Martins, Renata Patricia Rigoto, Marcio Luiz Denck Tramontin, Camila de Paula Freitas Dell´Aqua, Carlos Renato de Freitas Guaitolini, Rosiara Rosária Dias Maziero, Gabriela Passamani da Cruz
Rok vydání: 2020
Předmět:
Zdroj: Research, Society and Development; Vol. 9 No. 11; e309119459
Research, Society and Development; Vol. 9 Núm. 11; e309119459
Research, Society and Development; v. 9 n. 11; e309119459
Research, Society and Development
Universidade Federal de Itajubá (UNIFEI)
instacron:UNIFEI
Research, Society and Development, Vol 9, Iss 11 (2020)
ISSN: 2525-3409
DOI: 10.33448/rsd-v9i11.9459
Popis: Most researchers have frozen dog semen using methodologies described for other species. Consequently, these studies have shown that the thawed semen of dogs is of low quality, with conception rates lower than that of other species. Therefore, in this study, we evaluated different freezing protocols for canine semen, using three adult Bulldog Campeiro males, aged 2 to 5 years, with proven fertility. Five semen samples were collected from each animal using the penile bulb digital manipulation method. The collected samples were divided into: group 1, the samples were diluted directly in Botudog® commercial freezing medium (Botupharma Biotecnologia Animal) and group 2, the samples were centrifuged at 600 g for 10 min and the pellet was resuspended in Botudog®, totaling a concentration end of 200 x 106 sperm per ml. The samples were packaged in 0.5 mL straws at a concentration of 100 x 106 viable sperm. The samples remained for 1 h in stabilization at 4 °C and transferred to nitrogen vapor for 20 min, immersed in nitrogen, stored in a cryogenic cylinder, and thawed at 46 °C for 20 s. It was found that the total motility (MT, %), path speed (VAP, μm/s), progressive motility (PM, %), progressive linear speed (VSL; µm/s), curvilinear speed (VCL; µm/s), linearity (LIN, %), percentage of fast sperm (RAP, %), and plasma and acrosomal membrane integrity were higher in group 1, with samples not being centrifuged. These data demonstrate that the canine semen freezing protocol, using the Botudog® diluent, does not recommend the centrifugation of the ejaculate, prior to freezing. La mayoría de los investigadores han congelado el semen de perro, utilizando la metodología descrita para otras especies. Así, estos estudios han demostrado que el semen descongelado de los perros es de baja calidad, con tasas de concepción inferiores a las de otras especies. Así, este trabajo evaluó diferentes protocolos de congelación de semen canino, utilizando 3 machos adultos Bulldog Campeiro, de 2 a 5 años y con fertilidad comprobada. Se tomaron cinco muestras de semen de cada animal, utilizando el método de manipulación digital del bulbo del pene. Las muestras recolectadas se dividieron en: grupo 1, las muestras se diluyeron directamente en medio congelador comercial Botudog® (Botupharma Biotecnologia Animal) y grupo 2, las muestras se centrifugaron a 600g / 10min y el pellet se resuspendió en Botudog®, totalizando una concentración final de 200x106 espermatozoides por ml. Las muestras se empaquetaron en pajuelas de 0.5 mL con una concentración de 100x106 espermatozoides viables. Las muestras permanecieron 1 hora en estabilización a 4ºC y se transfirieron a vapor de nitrógeno durante 20 minutos, finalmente, se sumergieron en nitrógeno y se almacenaron en cilindro criogénico y se descongelaron a 46ºC / 20 s. Se encontró que la motilidad total (%), la velocidade progressiva (%), la velocidad de trajeto (VAP, μm/s), la velocidad lineal progresiva (VSL; µm / s), la velocidad curvilínea (VCL; µm / s), la linealidad (%), el porcentaje de espermatozoides rápidos (%) y la integridad de la membrana plasmática y acrosomal fueron mayores en el grupo 1, y las muestras no se centrifugaron. Estos datos demuestran que el protocolo para la congelación de semen canino, utilizando el diluyente Botudog®, no recomienda la centrifugación del eyaculado antes de la congelación. A maioria dos pesquisadores tem congelado o sêmen de cães, utilizando metodologia descrita para outras espécies. Assim, estes estudos têm demonstrado que o sêmen descongelado de cães é de baixa qualidade, com taxas de concepção inferiores a de outras espécies. Assim, este trabalho avaliou diferentes protocolos de congelação para sêmen canino, utilizando 3 machos, adultos, da raça Buldogue Campeiro, com idades entre 2 a 5 anos e fertilidade comprovada. Realizou-se 5 colheitas de sêmen de cada animal, pelo método de manipulação digital do bulbo peniano. As amostras colhidas foram divididas em: grupo 1, as amostras foram diluídas diretamente em meio de congelação comercial Botudog® (Botupharma Biotecnologia Animal) e grupo 2, as amostras foram centrifugadas a 600g/ 10min e o pellet ressuspendido em Botudog®, totalizando uma concentração final de 200x106 espermatozoides por mL. As amostras foram envasadas em palhetas de 0,5 mL com concentração de 100x106 espermatozoides viáveis. As amostras permaneceram por 1 hora em estabilização a 4ºC e transferidas para o vapor de nitrogênio durante 20 minutos, por fim, mergulhadas em nitrogênio e armazenadas em botijão criogênico e descongeladas a 46ºC/20s. Verificou-se que as motilidade total (%), motilidade progressiva (%), velocidade de trajeto (VAP, μm/s), velocidade linear progressiva (VSL; µm/s), velocidade curvilínea (VCL; µm/s), linearidade (%), percentagem de espermatozoides rápidos (%) e integridade de membrana plasmática e acrossomal foram superiores no grupo 1, onde as amostras não foram centrifugadas. Estes dados demonstram que o protocolo para congelação de sêmen canino, utilizando o diluente Botudog®, não preconiza a centrifugação do ejaculado, previamente a congelação.
Databáze: OpenAIRE
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