Highly efficient production of rabies virus glycoprotein G ectodomain in Sf9 insect cells
| Autor: | Alejandro Ferrari, María Victoria Miranda, Alexandra Marisa Targovnik, Victoria Alfonso, Ignacio Smith, María Gabriela López, Mariana Bernadett Arregui, Gregorio Juan Mc Callum, Lautaro Fidel Bracco, Salvador Herrero, María Martínez-Solís |
|---|---|
| Jazyk: | angličtina |
| Rok vydání: | 2019 |
| Předmět: |
BACULOVIRUS
Sf9 SF9 CELLS Environmental Science (miscellaneous) RABIES VIRUS GLYCOPROTEIN medicine.disease_cause purl.org/becyt/ford/1 [https] Ciencias Biológicas Antigen Affinity chromatography medicine purl.org/becyt/ford/1.6 [https] POLH PSEL PROMOTER chemistry.chemical_classification biology Chemistry Rabies virus Bioquímica y Biología Molecular Agricultural and Biological Sciences (miscellaneous) Molecular biology Ectodomain biology.protein Original Article Stem cell Antibody Glycoprotein CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS Biotechnology |
| Zdroj: | 3 Biotech CONICET Digital (CONICET) Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas instacron:CONICET |
| Popis: | In the present study, we developed a complete process to produce in insect cells a high amount of the ectodomain of rabies virus glycoprotein G (GE) as suitable antigen for detecting anti-rabies antibodies. Using the baculovirus expression vector system in Sf9 insect cells combined with a novel chimeric promoter (polh-pSeL), the expression level reached a yield of 4.1± 0.3 mg/L culture, which was signifcantly higher than that achieved with the standard polh promoter alone. The protein was recovered from the cell lysates and easily purifed in only one step by metal ion afnity chromatography, with a yield of 95% and a purity of 87%. Finally, GE was successfully used in an assay to detect specifc antibodies in serum samplesderived from rabies-vaccinated animals. The efcient strategy developed in this work is an interesting method to produce high amounts of this glycoprotein. Fil: Targovnik, Alexandra Marisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina Fil: Ferrari, Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; Argentina Fil: Mc Callum, Gregorio Juan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina Fil: Arregui, Mariana Bernadett. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina Fil: Smith, Ignacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina Fil: Bracco, Lautaro Fidel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina Fil: Alfonso, Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: López, María Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Martínez Solís, María. Universidad de Valencia. Estructura de Investigación Interdisciplinar en Biotecnología y Biomedicina; España Fil: Herrero, Salvador. Universidad de Valencia. Estructura de Investigación Interdisciplinar en Biotecnología y Biomedicina; España Fil: Miranda, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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