Detecção de Leishmania spp. em soro de caninos fixados em cartões

Autor: Ianca Moraes dos Santos Petry, Fernanda dos Santos Rolim, Tainá dos Santos Soares, Maria Eduarda Rossetti de Carvalho, Josiane Somariva Prophiro, Diego Soares Leote, Maria Lucia Rossetti
Rok vydání: 2022
Předmět:
Zdroj: Research, Society and Development; Vol. 11 No. 16; e582111638434
Research, Society and Development; Vol. 11 Núm. 16; e582111638434
Research, Society and Development; v. 11 n. 16; e582111638434
Research, Society and Development
Universidade Federal de Itajubá (UNIFEI)
instacron:UNIFEI
ISSN: 2525-3409
DOI: 10.33448/rsd-v11i16.38434
Popis: Visceral leishmaniasis is a serious zoonosis, and its molecular diagnosis is an important strategy. The detection of Leishmania spp. DNA from biological samples fixed in cards could solve problems related to the collect and transport of biological samples. The purpose of this study was to detect Leishmania spp. by PCR, using canine serum fixed in cards (CSFC). For evaluation, the PCR with DNA extracted from CSFC (PCR/card) was compared to the PCR with DNA from the same serum extracted using the Qiagen kit (PCR/Qiagen) and the immunochromatography test (Rapid test - RT). The results showed that out of the 112 analyzed samples, 12 (10.71%) were positive in the PCR/Qiagen, and of those, only two failed to amplify with DNA extracted from the CSFC. The RT was positive in 11 (9.8%) samples; however, only 3 (2.75%) samples of the total agreed with the detection of Leishmania spp. through PCR. Considering the PCR/Qiagen test as the reference standard for DNA detection, the agreement with the PCR/card was nearly perfect (K = 0.8). The concentration and purity of DNA in the two extractions were not significantly different. The use of PCR with DNA from CSFC showed that it can be an interesting alternative for the diagnosis of leishmaniasis. La leishmaniasis visceral es una zoonosis grave y el diagnóstico molecular es una estrategia importante. La detección de Leishmania spp. a partir de muestras biológicas fijadas en tarjetas comerciales puede resolver problemas relacionados con la recogida y transporte de muestras biológicas. El objetivo del estudio fue detectar Leishmania spp. por PCR utilizando ADN de suero canino fijado en tarjeta (SCFC). Para la evaluación, se comparó PCR con ADN extraído de SCFC (PCR/tarjeta) con PCR con ADN extraído con kit Qiagen (PCR/Qiagen) del mismo suero y con prueba inmunocromatográfica. Los resultados mostraron que, de 112 muestras analizadas, 12 (10,71%) resultaron positivas cuando se extrajo el ADN con el Qiagen Kit y de estas, solo dos no amplificaron con los ADN extraídos de SCFC. La inmunocromatográfica (test rápido) fue positiva en 12 (10,71%) de las muestras. Sin embargo, solo tres (2,75%) del total de muestras coincidieron con la detección de Leishmania spp. por PCR. Considerando la prueba PCR/Qiagen como estándar de referencia para la detección de ADN, la concordancia con la PCR/tarjeta fue casi perfecta (K=0,8). La concentración y el grado de pureza del ADN en las dos extracciones no difirieron significativamente. La PCR de SCFC mostró que puede ser una alternativa interesante para el diagnóstico de leishmaniasis. A leishmaniose visceral é uma zoonose grave, e o diagnóstico molecular é uma estratégia importante. A detecção de DNA de Leishmania spp. a partir de amostras biológicas fixadas em cartões comerciais pode resolver problemas relacionados à coleta e transporte de amostras biológicas. O objetivo do estudo foi detectar Leishmania spp. por PCR utilizando DNA de soro canino fixado cartão (SCFC). Para avaliação, o PCR com DNA extraído do SCFC (PCR/cartão) foi comparado com o PCR com DNA extraído com kit Qiagen (PCR/Qiagen) do mesmo soro e com teste de imunocromatografia. Os resultados mostraram que, de 112 amostras analisadas, 12 (10,71%) foram positivas quando o DNA era extraído com Kit Qiagen e dessas, apenas duas não amplificaram com DNAs extraído do SCFC. A imunocromatografia (teste rápido) foi positiva em 12 (10,71%) das amostras. Porém, apenas três (2,75%) do total de amostras concordaram com a detecção de Leishmania spp. por PCR. Considerando o teste da PCR/Qiagen como um padrão de referência para detecção de DNA, a concordância com o PCR/cartão foi quase perfeita (K=0,8). A concentração e o grau de pureza de DNA nas duas extrações não tiveram diferença significativa. O PCR a partir de SCFC mostrou que pode ser uma alternativa interessante para o diagnóstico de leishmaniose.
Databáze: OpenAIRE
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