Sensitivity of Extracellular Vesicles from Human Blood Serum to Various Detergents
| Autor: | A.B. Guekht, A.A. Yakovlev, T.A. Druzhkova, N.V. Gulyaeva |
|---|---|
| Rok vydání: | 2020 |
| Předmět: |
0301 basic medicine
Chromatography Chemistry Vesicle Size-exclusion chromatography General Medicine Microvesicles детергенты динамическое светорассеяние сыворотка крови микровезикулы экзосомы Sepharose 03 medical and health sciences EXPERIMENTAL RESEARCH 030104 developmental biology 0302 clinical medicine Blood serum Membrane Dynamic light scattering Chaps 030217 neurology & neurosurgery detergents dynamic light scattering blood serum microvesicles exosomes |
| Zdroj: | Biomedical Chemistry: Research and Methods |
| ISSN: | 2618-7531 |
| DOI: | 10.18097/bmcrm00143 |
| Popis: | Blood exosomes and microvesicles, collectively known as small extracellular vesicles (sEV), are vesicles about 100-150 nm in size. Small EV are involved in various aspects of signaling in the body; in addition, they can serve as markers of various pathologies. For biochemical studies, vesicle solubilization is often required. We tested the ability of various detergents to dissolve membranes of the sEV. Small EV were isolated from the blood serum of healthy volunteers by gel filtration on Sepharose CL-2B and tried to solubilize them using the anionic detergent DOC (sodium deoxycholate), non-ionic detergent Brij 35 (polyoxyethyleneglycol dodecyl ether), zwitterionic detergent CHAPS (3 - [(3-chloramidopropyl) dimethylammonio] -1-propanesulfonate), and cationic detergent CTAB (cetyl trimethylammonium bromide). The concentration of sEV in the solution was determined by dynamic light scattering. We find DOC is the most effective for sEV solubilization. Экзосомы и микровезикулы, совместно называемые малые экстраклеточные везикулы (мЭВ), представляют собой везикулы размером около 100-150 нм. Малые ЭВ принимают участие в самых разных аспектах сигналинга в организме; кроме того, они могут служить маркерами разных патологий. Для биохимических исследований зачастую требуется солюбилизация везикул. Мы проверили способность различных детергентов растворять мембраны мЭВ. Малые ЭВ выделяли из сыворотки крови здоровых добровольцев с помощью гель-фильтрации на Sepharose CL-2B и пытались их солюбилизировать с помощью анионного детергента DOC (дезоксихолат натрия), неионного детергента Brij 35 (додециловый эфир полиэтиленгликоля), цвиттерионного детергента CHAPS (3-[(3-хлорамидопропил) диметиламмонио]-1-пропансульфонат), катионного детергента CTAB (цетил триметиламмония бромид). Концентрацию мЭВ в растворе определяли с помощью динамического светорассеяния. Самым эффективным детергентом для солюбилизации мЭВ из сыворотки крови оказался DOC. |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
|