Preparation of a three-dimensional extracellular matrix by decellularization of rabbit livers

Autor: Nancy Alicia Salvatierra, Romina Comín, Ricardo A. M. Taborda, Laura Reyna, Gustavo A Nari, Mariana Paula Cid, Gustavo Juri
Rok vydání: 2013
Předmět:
Male
Pathology
medicine.medical_specialty
Reticular fiber
CIENCIAS MÉDICAS Y DE LA SALUD
Portal triad
Transplant
Ingeniería en Tejidos
Biotecnología de la Salud
Extracellular matrix
Hígado descelularizado
Andamios Biologicos
Microscopy
medicine
Retrograde perfusion
Animals
lcsh:RC799-869
purl.org/becyt/ford/3.4 [https]
Hígado Descelularizado
Andamios biológicos
Tecnologías que involucran la manipulación de células
tejidos
órganos o todo el organismo
Decellularization
Tissue Engineering
Tissue Scaffolds
business.industry
Gastroenterology
Capsule
General Medicine
Decellularized liver
Staining
Extracellular Matrix
Liver Transplantation
medicine.anatomical_structure
Liver
Biological scaffolds
Trasplante
lcsh:Diseases of the digestive system. Gastroenterology
purl.org/becyt/ford/3 [https]
Rabbits
business
Biomedical engineering
Zdroj: Revista Española de Enfermedades Digestivas v.105 n.3 2013
SciELO España. Revistas Científicas Españolas de Ciencias de la Salud
instname
CONICET Digital (CONICET)
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
instacron:CONICET
Revista Espanola de Enfermedades Digestivas, Vol 105, Iss 3, Pp 138-143 (2013)
ISSN: 1130-0108
Popis: Introduction: the availability of transplantable livers is not sufficient to fulfill the current demand for grafts, with the search for therapeutic alternatives having generated different lines of research, one of which is the use of decellularized three-dimensional biological matrices and subsequent cell seeding to obtain a functional organ. Objective: to produce a decellularization protocol from rabbit liver to generate a three-dimensional matrix. Methods: a combination of physical, chemical (Triton X-100 and SDS) and enzymatic agents to decellularize rabbit livers was used. After 68 h of retrograde perfusion, a decellularized translucent matrix was generated. To evaluate if the decellularization protocol was successful, with the extracellular matrix being preserved, we carried out histological (light microscopy and scanning electron microscopy) and biochemical (DNA quantification) studies. Results: the decellularization process was verified by macroscopic observation of the organ using macroscopic staining, which revealed a correct conservation of bile and vascular trees. A microscopic observation corroborated these macroscopic results, with the hematoxylin-eosin staining showing no cells or nuclear material and the presence of a portal triad. Wilde s staining demonstrated the conservation of reticulin fibers in the decellularized matrix. In addition, scanning electron microscopy revealed a preserved Glisson s capsule and a decellularized matrix, with the DNA quantification being less than 10 % in the decellularized liver compared to control. Finally, the time taken to develop the decellularization protocol was less than 96 hours. Conclusion: the proposed decellularization protocol was correct, and was verified by an absence of cells. The hepatic matrix had preserved vascular and bile ducts with a suitable three-dimensional architecture permitting further cell seeding. Fil: Nari, Gustavo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina; Argentina. Hospital Florencio Díaz. Departamento de Cirugía; Argentina Fil: Cid, Mariana Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas; Argentina Fil: Comin, Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas; Argentina. Universidad Nacional de Cordoba. Facultad de Ciencias Exactas Fisicas y Naturales. Departamento de Quimica; Argentina Fil: Reyna Musso, Laura. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas Físicas y Naturales. Departamento de Electrónica. Laboratorio de Investigación Aplicada y Desarrollo; Argentina Fil: Juri, Gustavo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina; Argentina Fil: Taborda, Ricardo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas Físicas y Naturales. Departamento de Electrónica. Laboratorio de Investigación Aplicada y Desarrollo; Argentina Fil: Salvatierra, Nancy Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas; Argentina. Universidad Nacional de Cordoba. Facultad de Ciencias Exactas Fisicas y Naturales. Departamento de Quimica; Argentina
Databáze: OpenAIRE
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