Transformación de frijol común (Phaseolus vulgaris) var. Brunca mediada por Agrobacterium tumefaciens
| Autor: | Arturo Brenes-Angulo, Julio-César Ortiz-Pavón, Enrique Castaño de la Serna, Romano Porras-Murillo, Antonio Andrade-Torres, Laura-Yesenia Solís-Ramos |
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| Jazyk: | angličtina |
| Rok vydání: | 2019 |
| Předmět: |
biology
transformación genética NptII common bean recalcitrant species genetic transformation A. tumefaciens gusA activit nptII Especies recalcitrantes Actividad gusA Agrobacterium tumefaciens biology.organism_classification frijol común especies recalcitrantes actividad gusA Molecular biology GusA activit Genetic transformation Frijol común Transformation (genetics) Common bean Phaseolus General Agricultural and Biological Sciences Recalcitrant species Trans-formación genética |
| Zdroj: | Revista de Biología Tropical; Vol. 67 No. S2 (2019): Volume 67 – Supplement 2 – April 2019: School of Biology University of Costa Rica 60th anniversary 1957-2017; S83-S94 Revista de Biología Tropical; Vol. 67 Núm. S2 (2019): Volumen 67 – Suplemento 2 – Abril 2019: Escuela de Biología Universidad de Costa Rica 60 aniversario 1957-2017; S83-S94 Revista Biología Tropical; Vol. 67 N.º S2 (2019): Volumen 67 – Suplemento 2 – Abril 2019: Escuela de Biología Universidad de Costa Rica 60 aniversario 1957-2017; S83-S94 Portal de Revistas UCR Universidad de Costa Rica instacron:UCR Revista de Biología Tropical, vol.67(2 Suplemento), pp.S83-S94. Kérwá Revista de Biología Tropical, Volume: 67, Issue: 2, Pages: 83-94, Published: APR 2019 |
| ISSN: | 2215-2075 0034-7744 |
| DOI: | 10.15517/rbt.v67i2SUPL |
| Popis: | Common bean is a crop recalcitrant to in vitro regeneration and therefore it lacks an efficient trans-formation protocol that can be reproduced using A. tumefaciens. The main goal of this study was to establish a protocol for A. tumefaciens mediated transformation of Phaseolus vulgaris var. Brunca by marker genes (gusAand nptII) together with the gene for trehalose-6-phosphate synthase from Saccharomyces cerevisiae (TPS1) used in other species to increase tolerance to abiotic stress. The β-glucuronidase activity was detected in 45 % of the LBA4404 ElectroMAX® pCAMBIA1301 infected explants. Transformed explants regenerated new shoots after four to five months period in a kanamycin rich media. Surviving plants were evaluated by PCR and presented an 0.5 % efficiency of transformation. The established protocol for genetic transformation of common bean has two additional advantages with respect to previous reports: (1) it allows for obtaining transformed regenerants and (2) the genetic transformation was stable for the selective gene. El frijol común en un cultivo recalcitrante a la regeneración in vitro y se carece de un protocolo eficiente y reproducible de transformación genética usando A. tume-faciens. Desarrollamos un protocolo de transformación genética mediada por A. tumefaciens de frijol común varie-dad Brunca utilizando genes marcadores (gusA y nptII) junto con el gen de la trehalosa-6-fosfato sintasa de leva-dura (TPS1) utilizado para incrementar tolerancia a estrés abiótico. La actividad de la β-glucoronidasa fue detectada en 45 % de los explantes infectados con la cepa LBA4404 de A. tumefaciens transformada con pCAMBIA1301. Después de 4 o 5 meses se regeneraron tallos en un medio adicionado con kanamicina. Los explantes supervivientes se evaluaron mediante PCR y presentaron una eficiencia de transformación de 0.5 %. El protocolo de transformación genética de frijol común establecido tiene dos ventajas adicionales con respecto a los reportes previos: (1) permite la obtención de regenerares transformados y (2) la transfor-mación genética fue estable para el gen selectivo. Universidad de Costa Rica/[111-B2-052]/UCR/Costa Rica UCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias Agroalimentarias::Centro de Investigaciones Agronómicas (CIA) UCR::Vicerrectoría de Docencia::Ciencias Básicas::Facultad de Ciencias::Escuela de Biología |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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