Expression of TCRγδ receptor genes in jejunum mucosa of baby alpacas (Vicugna pacos)
Autor: | Gina Castro S, Danilo Pezo C., Simón Mendizábal J, Alberto Manchego S., Mercy Ramírez V, Nieves Sandoval C |
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Jazyk: | Spanish; Castilian |
Rok vydání: | 2017 |
Předmět: |
alpaca
Messenger RNA alpacas General Veterinary RT-PCR tiempo real T-cell receptor relative quantification cuantificación relativa Biology Molecular biology Reverse transcriptase Jejunum delta medicine.anatomical_structure Intestinal mucosa Complementary DNA medicine RT-PCR real time Colostrum gamma Gene TCR |
Zdroj: | Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú; Vol 28 No 4 (2017); 1020-1028 Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú; Vol. 28 Núm. 4 (2017); 1020-1028 |
ISSN: | 1609-9117 1682-3419 |
Popis: | El objetivo de este estudio fue determinar la expresión de genes del receptor TCRγδ (gamma y delta) en el epitelio yeyunal de 16 crías de alpaca aparentemente sanas, de 2 a 47 días de edad, mediante la cuantificación de ARN mensajero (ARNm) utilizando cebadores específicos. Se tomaron porciones de yeyuno (2 cm de longitud). El ARNm total de la mucosa de la porción media del yeyuno actuó como molde para la síntesis de ADN complementario mediante transcripción reversa (RT), seguida de un PCR-tiempo real para la amplificación y cuantificación de los ARNm de los polipéptidos que conforman las cadenas gamma y delta del TCR. Se utilizó el método 2-ΔΔCt para la cuantificación relativa de ARNm, teniendo como calibrador a dos crías neonatas que no habían consumido calostro. Las crías de 1, 2, 3 y ≥4 semanas de edad expresaron el gen gamma en 4.75, 6.78, 16.24 y 103.11 veces lo expresado por los animales calibradores, respectivamente, y el gen delta fue expresado en 9.43, 20.78, 25.08 y 146.46 veces, respectivamente. Los resultados demuestran que los genes gamma y delta se expresan en forma creciente con la edad, y significativamente a partir de la cuarta semana de edad (p The aim of this study was to determine the expression of TCRγδ receptor genes (gamma and delta) in the jejunal epithelium of 16 apparently healthy baby alpacas (2 to 47 days of age), by quantifying messenger RNA (mRNA) using specific primers. Jejunumsamples (2 cm long) were collected. Total mRNA of the medium portion of the jejunum acted as template for complementary DNA synthesis by reverse transcription (RT), followed by real-time PCR for the amplification and quantification of the mRNAs of the polypeptides that make up the gamma and delta chains of the TCR. The 2-ΔΔCt method was used for the relative mRNA quantification, using as calibrator two neonatal alpacas that had not consumed colostrum. The alpacas of 1, 2, 3 and >4 weeks of age expressed the gamma gene at 4.75, 6.78, 16.24 and 103.11 folds as expressed by the calibrator animals, respectively, and the delta gene was expressed at 9.43, 20.78, 25.08, and 146.46 folds, respectively. The results demonstrate that gamma and delta genes are increasingly expressed with age, and significantly from the fourth week of age (p |
Databáze: | OpenAIRE |
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