Dispositivo híbrido de PVA/colágeno ácido hialurônico cultivado com células-tronco para regeneração dérmica

Autor: Domingues, Juliana Almeida, 1986
Přispěvatelé: Camilli, Jose Angelo, 1963, Duek, Eliana Aparecida de Rezende, 1961, Oliveira, Alexandre Leite Rodrigues de, Santos Junior, Arnaldo Rodrigues dos, Mathor, Monica Beatriz, Bombeiro, André Luis, Universidade Estadual de Campinas. Instituto de Biologia, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Estrutural, UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
Rok vydání: 2021
Předmět:
Zdroj: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron:UNICAMP
DOI: 10.47749/t/unicamp.2018.1064141
Popis: Orientadores: José Angelo Camilli, Eliana Aparecida de Rezende Duek Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Neste estudo, obteve-se um equivalente cutâneo composto por membrana de poli(álcool vinifico) (PVA) contendo nanopartículas de prata (AgNPs) e um arcabouço de colágeno-ácido hialurônico (col-AH) cultivado com células-tronco mesenquimais de tecido adiposo (ASC). O material foi caracterizado por microscopia eletrônica de varredura (MEV), microscopia eletrônica de transmissão (MET), micro-CT, ensaio microbiológico, citocompatibilidade com as ASC e liberação de Ag+ no meio de cultivo por espectrometria de emissão óptica com fonte de plasma (ICP-OES). Além disso, também foi analisado o potencial imunomodulatório das ASC cultivadas no col-AH sobre os macrófagos e a relação dessa imunomodulação sobre a expressão gênica de marcadores fibróticos pelos fibroblastos. A imunomodulação foi analisada por citometria de fluxo. A produção de citocinas inflamatórias e anti-inflamatórias foi analisada pelo Imunoensaio Multiplex. Foi demonstrado que o material apresenta poros e que uma pequena concentração de Ag+ é liberada do PVA. A presença das AgNPs não interferiu no crescimento das ASC. As ASC modularam a resposta dos macrófagos a um fenótipo anti-inflamatório por aumentarem a expressão de CD206, além de reduzirem também a quantidade de macrófagos M1(CD86+CD206-). O arcabouço de col-AH aumentou a modulação pelas ASC. O dispositivo desenvolvido é apropriado como substituto cutâneo, pois evita perda de água e infecção por microrganismos, além de modular a resposta dos macrófagos para M2. O sistema de co-cultura tridimensional (3D) desenvolvido, permite maiores estudos a respeito da modulação das mesenquimais sobre os macrófagos, em ambiente in vitro de forma mais semelhante ao in vivo Abstract: In this study, a cutaneous equivalent composed of poly (vinyl alcohol) (PVA) membrane containing silver nanoparticles (AgNPs) and a collagen-hyaluronic acid scaffold (col-HA) cultured with adipose derived mesenchymal stem cells (ASC). The material was characterized by scanning electron microscopy (SEM), transmission electron microscopy (TEM), micro-CT, microbiological assay, cytocompatibility with ASCs and release of Ag+ into the culture medium by optical emission spectrometry with plasma source (ICP-OES). Additionally, it was analyzed the potential immunomodulatory effects of ASCs cultured in col-HA in macrophages response and the correlation of such immunomodulation on fibroblasts gene expression. Flow cytometry was performed to analyze immunomodulation. The production of inflammatory and anti-inflammatory cytokines was analyzed by Multiplex Imunoassay. It was shown by SEM and Confocal Microscopy that both PVA and collagen had porous structure and PVA had a slight release of Ag+. Such release did not interfere in the ASC growth. The ASC modulated the macrophages response into an anti-inflammatory phenotype due to the increased CD206 expression, as well as reduced type M1 macrophages (CD86+ CD206-). The col-HA scaffold increased the ASC modulation. The developed device is suitable as a cutaneous substitute, since it avoids loss of water and microorganisms infection, and also modulates macrophages response to type M2. The three-dimensional (3D) co-culture system here developed open news insights for further studies directed to the in vitro modulation of mesenchymal cells over macrophages response, mimicking a similar environment with in vivo features Doutorado Biologia Celular Doutora em Biologia Celular e Estrutural CNPQ 140823/2015-8 CAPES
Databáze: OpenAIRE
Externí odkaz: