5B9, a monoclonal anti-platelet factor 4 /heparin IgG with a human Fc fragment that mimics heparin-induced thrombocytopenia antibodies

Autor: Yves Gruel, Caroline Vayne, Jérôme Rollin, Yuhang Zhou, G. Champier, Steven E. McKenzie, Claire Kizlik-Masson, Claire Pouplard, Anne Poupon
Přispěvatelé: Génétique, immunothérapie, chimie et cancer (GICC), UMR 7292 CNRS [2012-2017] (GICC UMR 7292 CNRS), Université de Tours (UT)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Université Francois Rabelais [Tours], Laboratoire d'Hématologie-Hémostase, Centre Hospitalier Régional Universitaire de Tours (CHRU Tours), Department of Medicine, Cardeza Foundation for Hematologic Research, Thomas Jefferson University, Physiologie de la reproduction et des comportements [Nouzilly] (PRC), Institut National de la Recherche Agronomique (INRA)-Institut Français du Cheval et de l'Equitation [Saumur]-Université de Tours (UT)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Dynamiques de populations multi-échelles pour des systèmes physiologiques (MUSCA), Inria Saclay - Ile de France, Institut National de Recherche en Informatique et en Automatique (Inria)-Institut National de Recherche en Informatique et en Automatique (Inria)-Physiologie de la reproduction et des comportements [Nouzilly] (PRC), Institut Français du Cheval et de l'Equitation [Saumur]-Université de Tours (UT)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Institut National de Recherche pour l’Agriculture, l’Alimentation et l’Environnement (INRAE)-Institut Français du Cheval et de l'Equitation [Saumur]-Université de Tours (UT)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Institut National de Recherche pour l’Agriculture, l’Alimentation et l’Environnement (INRAE)-Mathématiques et Informatique Appliquées du Génome à l'Environnement [Jouy-En-Josas] (MaIAGE), Institut National de Recherche pour l’Agriculture, l’Alimentation et l’Environnement (INRAE)-Institut National de Recherche pour l’Agriculture, l’Alimentation et l’Environnement (INRAE), MAbSilico SAS, B-Cell Design (B-Cell Design), Institut pour la Recherche sur la Thrombose et l’Hémostase [IRTH], Program 'Investissements d’avenir Grant Agreement LabEx MAbImprove: ANR-10-LABX-53', Université de Tours-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Université de Tours-Institut Français du Cheval et de l'Equitation [Saumur]-Institut National de la Recherche Agronomique (INRA), Institut National de la Recherche Agronomique (INRA)-Institut Français du Cheval et de l'Equitation [Saumur] (IFCE)-Université de Tours (UT)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Institut Français du Cheval et de l'Equitation [Saumur] (IFCE)-Université de Tours (UT)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Institut National de Recherche pour l’Agriculture, l’Alimentation et l’Environnement (INRAE)-Institut Français du Cheval et de l'Equitation [Saumur] (IFCE)-Université de Tours (UT)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Institut National de Recherche pour l’Agriculture, l’Alimentation et l’Environnement (INRAE)-Mathématiques et Informatique Appliquées du Génome à l'Environnement [Jouy-En-Josas] (MaIAGE), Institut National de la Recherche Agronomique (INRA)-Institut Français du Cheval et de l'Equitation [Saumur]-Université de Tours-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Mathématiques et Informatique Appliquées du Génome à l'Environnement [Jouy-En-Josas] (MaIAGE), Institut National de Recherche pour l’Agriculture, l’Alimentation et l’Environnement (INRAE)-Institut National de Recherche pour l’Agriculture, l’Alimentation et l’Environnement (INRAE)-Inria Saclay - Ile de France, Institut Français du Cheval et de l'Equitation [Saumur]-Université de Tours-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Institut National de Recherche pour l’Agriculture, l’Alimentation et l’Environnement (INRAE)-Institut Français du Cheval et de l'Equitation [Saumur]-Université de Tours-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Institut National de Recherche pour l’Agriculture, l’Alimentation et l’Environnement (INRAE)
Jazyk: angličtina
Rok vydání: 2017
Předmět:
0301 basic medicine
Time Factors
Platelet Aggregation
Neutrophils
thrombocytopenia
030204 cardiovascular system & hematology
heparin
Platelet Factor 4
Epitope
Cell Degranulation
heparinic acid
0302 clinical medicine
Antibody Specificity
monoclonal antibody
platelet activation
Mice
Inbred BALB C
biology
Chemistry
[SDV.MHEP.HEM]Life Sciences [q-bio]/Human health and pathology/Hematology
Heparin
Hematology
3. Good health
Molecular Docking Simulation
Monoclonal
Antibody
medicine.drug
Protein Binding
Autre (Sciences du Vivant)
Blood Platelets
[SDV.OT]Life Sciences [q-bio]/Other [q-bio.OT]
medicine.drug_class
biologie computationnelle
Mice
Transgenic
héparine
Monoclonal antibody
Antibodies
Monoclonal
Humanized
03 medical and health sciences
Tissue factor
Heparin-induced thrombocytopenia
medicine
Animals
Humans
Binding Sites
Hybridomas
Immunodominant Epitopes
Receptors
IgG
medicine.disease
Molecular biology
Immunoglobulin Fc Fragments
Disease Models
Animal
030104 developmental biology
Immunoglobulin G
anticorps monoclonal
biology.protein
Immunization
Platelet factor 4
Hématologie
Zdroj: Journal of Thrombosis and Haemostasis
Journal of Thrombosis and Haemostasis, Wiley, 2017, 15 (10), pp.1-28. ⟨10.1111/jth.13786⟩
Journal of Thrombosis and Haemostasis, Wiley, 2017, pp.1-28. ⟨10.1111/jth.13786⟩
Journal of Thrombosis and Haemostasis 10 (15), 2065-2075. (2017)
Journal of Thrombosis and Haemostasis, 2017, 15 (10), pp.1-28. ⟨10.1111/jth.13786⟩
ISSN: 1538-7933
1538-7836
DOI: 10.1111/jth.13786⟩
Popis: Essentials No humanized monoclonal antibody was available to study heparin-induced thrombocytopenia (HIT). We developed the first anti-platelet factor 4 (PF4)/heparin antibody with a human Fc fragment. This antibody (5B9) fully mimics the effects of human HIT antibodies. 5B9 binds two regions within PF4 that may be critical for the pathogenicity of HIT antibodies. SummaryBackground The diagnosis of heparin-induced thrombocytopenia (HIT) is based on clinical and biological criteria, but a standard is lacking for laboratory assays. Moreover, no humanized HIT antibody is available for pathophysiological studies. Objective To characterise 5B9, a chimeric monoclonal antibody, which fully mimics the effects of human HIT antibodies. Methods/Results 5B9, a chimeric anti-platelet factor 4/heparin complexes IgG1 antibody, was obtained after immunizing specific transgenic mice. 5B9 induced heparin FcγRIIA-dependent platelet aggregation and tissue factor mRNA synthesis in monocytes. It also induced significant thrombocytopenia and thrombin generation in mice expressing human PF4 and FcγRIIA receptors. The binding of 5B9 to PF4/H complexes was inhibited by 15 of 25 HIT plasma samples and only three of 25 samples containing non-pathogenic anti-PF4/H antibodies. KKO, a murine IgG2b HIT antibody, also inhibited the binding of 5B9 to PF4/H, suggesting that epitopes recognized by both antibodies are close. A docking analysis based on VH and VL sequences of 5B9 showed that binding of 5B9 Fab to PF4 involved 12 and 12 residues in B and D monomers, respectively, including seven previously identified as critical to the formation of a PF4/KKO complex. Two regions (Asp-7 to Thr-15 and Ala-32 to Thr-38) therefore appeared important for the binding of 5B9 and KKO on PF4 modified by heparin. Conclusions 5B9 is the first anti-PF4/H monoclonal antibody with a human Fc fragment, which induces similar cellular activation as HIT antibodies. Moreover, 5B9 binds epitopes within PF4 that are likely to be critical for the pathogenicity of HIT antibodies.
Databáze: OpenAIRE
Externí odkaz: