Methodological aspects of Universal immuno-PCR on standard tubes
| Autor: | Marcos Oggero, Clarisa Guillermina Santamaria, Julián Elías Abud, Horacio A. Rodríguez |
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| Rok vydání: | 2019 |
| Předmět: |
CIENCIAS MÉDICAS Y DE LA SALUD
Biophysics Thyrotropin Tecnologías que involucran la identificación de ADN proteínas y enzimas y cómo influyen en el conjunto de enfermedades y mantenimiento del bienestar Polymerase Chain Reaction 01 natural sciences Biochemistry MONOCLONAL ANTIBODIES Biotecnología de la Salud HUMAN TSH 03 medical and health sciences chemistry.chemical_compound DIAGNOSTIC Limit of Detection IMMUNE-PCR Humans Biotinylation Molecular Biology 030304 developmental biology Immuno pcr Immunoassay Detection limit 0303 health sciences Reproducibility Chromatography biology Chemistry Hybridization probe 010401 analytical chemistry Reproducibility of Results Cell Biology IMMUNOASSAYS 0104 chemical sciences biology.protein Glutaraldehyde DNA Probes Conjugate Avidin |
| Zdroj: | Analytical Biochemistry. 570:56-61 |
| ISSN: | 0003-2697 |
| Popis: | One of the most used formats in inmuno-polymerase chain reaction (IPCR) is known as "Universal" IPCR (signal-generating complexes is based on conjugates of biotinylated DNA, biotinylated IgG and avidin). In the present study, we evaluated the utility of using mono- and bi-biotinylated DNA probes, pre-self-assembled DNA-neutravidin complex, blocking step and glutaraldehyde pretreatment of standard PCR tubes to improve the analytical performance of the hTSH-IPCR assay. The use of pre-self-assembled mono-biotinylated DNA-neutravidin complex enhances both the sensitivity and the reproducibility of the hTSH-IPCR assay, even without blocking step: hTSH-IPCR assay showed an improved limit of detection (LOD: 0.01 μIU/ml), calibration sensitivity (SEN: 2.4) and analytic sensitivity (γ: 9 μIU/ml −1 ) in comparison with both a self-made ELISA and a commercial one. Fil: Abud, Julián Elías. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Salud y Ambiente del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Instituto de Salud y Ambiente del Litoral; Argentina Fil: Santamaría, Clarisa Guillermina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Salud y Ambiente del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Instituto de Salud y Ambiente del Litoral; Argentina Fil: Oggero Eberhardt, Marcos Rafael. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Laboratorio de Cultivos Celulares; Argentina Fil: Rodriguez, Horacio Adolfo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Salud y Ambiente del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Instituto de Salud y Ambiente del Litoral; Argentina |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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