Towards genetic engineering of maritime pine (Pinus pinaster Ait.)
| Autor: | Francis Canlet, Josiane Hoebeke, Jean-François Trontin, Marc Pâques, Lydia Arancio, Elizabeth Garin, Manuel Lopez-Vernaza, Luc Harvengt |
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| Rok vydání: | 2002 |
| Předmět: |
0106 biological sciences
Rhizobiaceae Somatic embryogenesis biolistic Hygromycin-B kinase transgenic plant---Pinus pinaster 01 natural sciences 03 medical and health sciences chemistry.chemical_compound Tissue culture [SDV.SA.SF]Life Sciences [q-bio]/Agricultural sciences/Silviculture forestry Botany 14. Life underwater 030304 developmental biology 2. Zero hunger 0303 health sciences Ecology biology fungi Forestry Agrobacterium tumefaciens somatic embryogenesis biology.organism_classification Transformation (genetics) chemistry embryogenèse somatique plante transgénique Pinus pinaster biolistique Hygromycin B 010606 plant biology & botany |
| Zdroj: | Annals of Forest Science Annals of Forest Science, Springer Nature (since 2011)/EDP Science (until 2010), 2002, 59 (5-6), pp.687-697. ⟨10.1051/forest:2002057⟩ Scopus-Elsevier |
| ISSN: | 1297-966X 1286-4560 |
| Popis: | International audience; Using our improved protocols for somatic embryogenesis in Pinus pinaster, transgenic tissues and plantlets were recovered after microprojectile bombardment (biolistic) or cocultivation of embryonal-suspensor masses (ESM) with Agrobacterium tumefaciens. Transformation experiments were carried out with selectable hpt gene (hygromycin B resistance) and reporter gus gene ($\beta$-glucuronidase activity). With both methods, hygromycin was shown to be an effective selective agent of transformed cells within 4-19 weeks. The mean number of hygromycin-resistant lines expressing gus per gram ESM subjected to DNA transfer, ranged from 7.0 to 8.5 using biolistic and 0 to 67.3 during Agrobacterium experiments. Mature somatic embryos obtained from some transformed lines were converted into plantlets and grown in the greenhouse. The whole process (from transformation to plant acclimatisation) could be completed within only 12 months. The transgenic state of ESM, somatic embryos and plants was confirmed by histochemical GUS assays and molecular methods.; Transformation génétique du pin maritime (Pinus pinaster Ait.). En appliquant nos protocoles d'embryogenèse somatique développés pour Pinus pinaster, des tissus et plantes transgéniques ont été obtenus après bombardement avec des microparticules (biolistique) ou coculture de masses embryonnaires (ESM) avec Agrobacterium tumefaciens. Les expériences de transformation ont été conduites à l'aide du gène de sélection hpt (résistance à l'hygromycine B) et du gène rapporteur gus (activité $\beta$-glucuronidase). L'hygromycine a permis de sélectionner efficacement les cellules transformées par ces deux méthodes en 4 à 19 semaines. Le nombre moyen de lignées résistantes à l'hygromycine exprimant le gène gus obtenu par gramme d'ESM varie de 7,0 à 8,5 (biolistique) ou de 0 à 67,3 (Agrobacterium). Les embryons matures obtenus à partir de certaines de ces lignées ont pu être convertis en plantules élevées en serre. Seulement 12 mois sont nécessaires de la transformation des ESM jusqu'à l'acclimatation des plantes. La nature transgénique des ESM, embryons somatiques et plantes, a été confirmée à l'aide de tests histochimiques " GUS " et de méthodes moléculaires. |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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