Isolamento das ilhotas pancreáticas pela separação mecânica-enzimática digestão estacionária com colagenase e purificação com gradiente de densidade descontínua de dextran: estudo experimental em cães
| Autor: | Heloisa P. Soares, Jaques Waisberg, Osíris Ramaciotti, Luís Gustavo Altieri, Manlio Basílio Speranzini |
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| Jazyk: | angličtina |
| Rok vydání: | 2002 |
| Předmět: |
endocrine system
medicine.medical_specialty endocrine system diseases Density gradient Biology Diabetes Mellitus Experimental chemistry.chemical_compound Islets of Langerhans Internal medicine medicine Diabetes Mellitus Ilhotas de Langerhans geography Transplantation Chromatography geography.geographical_feature_category Pancreatic islets Islet Staining medicine.anatomical_structure Endocrinology Dextran chemistry Transplante Collagenase Surgery Pancreas medicine.drug |
| Zdroj: | Acta Cirúrgica Brasileira v.17 n.2 2002 Acta Cirúrgica Brasileira Sociedade Brasileira para o Desenvolvimento da Pesquisa em Cirurgia (SBDPC) instacron:SBDPC Acta Cirurgica Brasileira, Volume: 17, Issue: 2, Pages: 89-94, Published: APR 2002 |
| Popis: | The prospects for allotransplantation of pancreatic islets in man depend on the development of methods that provide sufficient quantities of pancreatic islets from a single donor, which are capable, when transplanted, of achieve the normalization of carbohydrate metabolism. Objective: Evaluate the efficacy of the isolation of Langerhans islets from dogs, by means of mechanical-enzymatic separation technique with stationary digestion using collagenase, and purification with a discontinuous dextran density gradient. Methods: The counting of islet numbers and evaluation of their sizes was accomplished by staining with diphenylthiocarbazone and using stereoscopic microscopes equipped with eyepiece reticule for the measurement of average diameters of stained islets. Results: The results disclosed that the average number of islets isolated was 81032.20 ± 24736.79 and the average number of islets isolated per kg of body weight was 6938.70 ± 1392.43. The average number of islets isolated per kg of body weight showed significant correlation with body weight and weight of the pancreas resected. Conclusion: The number of islets isolated, of a single donor, by mechanical-enzymatic separation, stationary collagenase digestion and discontinuous dextran density gradient purification can be sufficient to success of pancreatic islets transplant in dogs. A perspectiva do alotransplante de ilhotas pancreáticas no homem está na dependência do desenvolvimento de métodos que propiciem quantidades suficientes de ilhotas pancreáticas, originadas de doador único, capazes de, quando transplantadas, levarem à normalização do metabolismo dos hidratos de carbono. Objetivo: Avaliar, em cães, a eficácia do isolamento das ilhotas de Langerhans por meio da técnica de separação mecânica-enzimática, digestão estacionária com colagenase e purificação pelo gradiente de densidade descontínua de dextran. Métodos: A contagem do número e avaliação do tamanho das ilhotas foi realizada pela coloração com difeniltiocarbazona e exame em microscópio estereoscópico munido de retícula ocular para medição do diâmetro médio das ilhotas coradas. Resultados: O número médio de ilhotas isoladas foi de 81032,20 ± 24736.79 e o número médio de ilhotas/kg de peso corpóreo foi de 6938,70± 1392,43. O número médio de ilhotas/kg de peso corpóreo obtido mostrou correlação significativa com peso corpóreo e peso do pâncreas extirpado. Conclusão: Estes resultados sugerem que o número de ilhotas isoladas, de um único doador, por meio da separação mecânica-enzimática, digestão estacionária com colagenase e purificação pelo gradiente de densidade descontínua de dextran pode ser suficiente para o sucesso do transplante de ilhotas pancreáticas em cães. |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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