Accurate protein-peptide titration experiments by nuclear magnetic resonance using low-volume samples
Autor: | Bruno Kieffer, Raphaël Recht, Christian Köhler, Marc-André Delsuc, Marc Quinternet, Frédéric De Lamotte |
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Přispěvatelé: | Kieffer, Bruno, Institut de Génétique et de Biologie Moléculaire et Cellulaire (IGBMC), Université de Strasbourg (UNISTRA)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Amélioration génétique et adaptation des plantes méditerranéennes et tropicales (UMR AGAP), Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement (Cirad)-Institut National de la Recherche Agronomique (INRA)-Centre international d'études supérieures en sciences agronomiques (Montpellier SupAgro)-Institut national d’études supérieures agronomiques de Montpellier (Montpellier SupAgro), Institut national d'enseignement supérieur pour l'agriculture, l'alimentation et l'environnement (Institut Agro)-Institut national d'enseignement supérieur pour l'agriculture, l'alimentation et l'environnement (Institut Agro) |
Jazyk: | angličtina |
Rok vydání: | 2015 |
Předmět: |
Accuracy and precision
Materials science Capillary action méthode de mesure Analytical chemistry Peptide 010402 general chemistry 01 natural sciences 03 medical and health sciences Autre (Chimie) 030304 developmental biology chemistry.chemical_classification 0303 health sciences Nuclear magnetic resonance spectroscopy affinity measurements NMR 0104 chemical sciences Dissociation constant Low volume protein-peptide interactions chemistry Titration equilibrium binding constants Other spectrographie [CHIM.OTHE]Chemical Sciences/Other |
Zdroj: | Affinity Chromatography. (1286), 2015, 279-296 Affinity Chromatography : Methods and Protocols Affinity Chromatography : Methods and Protocols, 1286, Humana Press, 341 p., 2015, Methods in Molecular Biology, 978-1-4939-2447-9. ⟨10.1007/978-1-4939-2447-9_22⟩ Methods in Molecular Biology ISBN: 9781493924462 |
Popis: | AGAP : équipe ID; International audience; NMR spectroscopy allows measurements of very accurate values of equilibrium dissociation constants using chemical shift perturbation methods, provided that the concentrations of the binding partners are known with high precision and accuracy. The accuracy and precision of these experiments are improved if performed using individual capillary tubes, a method enabling full automation of the measurement. We provide here a protocol to set up and perform these experiments as well as a robust method to measure peptide concentrations using tryptophan as an internal standard. |
Databáze: | OpenAIRE |
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