Accurate protein-peptide titration experiments by nuclear magnetic resonance using low-volume samples

Autor: Bruno Kieffer, Raphaël Recht, Christian Köhler, Marc-André Delsuc, Marc Quinternet, Frédéric De Lamotte
Přispěvatelé: Kieffer, Bruno, Institut de Génétique et de Biologie Moléculaire et Cellulaire (IGBMC), Université de Strasbourg (UNISTRA)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Amélioration génétique et adaptation des plantes méditerranéennes et tropicales (UMR AGAP), Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement (Cirad)-Institut National de la Recherche Agronomique (INRA)-Centre international d'études supérieures en sciences agronomiques (Montpellier SupAgro)-Institut national d’études supérieures agronomiques de Montpellier (Montpellier SupAgro), Institut national d'enseignement supérieur pour l'agriculture, l'alimentation et l'environnement (Institut Agro)-Institut national d'enseignement supérieur pour l'agriculture, l'alimentation et l'environnement (Institut Agro)
Jazyk: angličtina
Rok vydání: 2015
Předmět:
Zdroj: Affinity Chromatography. (1286), 2015, 279-296
Affinity Chromatography : Methods and Protocols
Affinity Chromatography : Methods and Protocols, 1286, Humana Press, 341 p., 2015, Methods in Molecular Biology, 978-1-4939-2447-9. ⟨10.1007/978-1-4939-2447-9_22⟩
Methods in Molecular Biology ISBN: 9781493924462
Popis: AGAP : équipe ID; International audience; NMR spectroscopy allows measurements of very accurate values of equilibrium dissociation constants using chemical shift perturbation methods, provided that the concentrations of the binding partners are known with high precision and accuracy. The accuracy and precision of these experiments are improved if performed using individual capillary tubes, a method enabling full automation of the measurement. We provide here a protocol to set up and perform these experiments as well as a robust method to measure peptide concentrations using tryptophan as an internal standard.
Databáze: OpenAIRE