Determination of disulfide bridges in natural and recombinant insect defensin A

Autor: Jules A. Hoffmann, F. Bitsch, Jean-Luc Dimarcq, Elisabeth Keppi, Jean-Marc Reichhart, Pierre Lepage, Carolyn Roitsch, Alain Van Dorsselaer, D. Roecklin
Přispěvatelé: Réponse immunitaire et developpement chez les insectes (RIDI - UPR 9002), Université de Strasbourg (UNISTRA)-Institut de biologie moléculaire et cellulaire (IBMC), Université de Strasbourg (UNISTRA)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM), Modèles Insectes de l'Immunité Innée (M3I), Institut de biologie moléculaire et cellulaire (IBMC), Université de Strasbourg (UNISTRA)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Université de Strasbourg (UNISTRA)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Université de Strasbourg (UNISTRA)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Institut Pluridisciplinaire Hubert Curien (IPHC), Institut National de Physique Nucléaire et de Physique des Particules du CNRS (IN2P3)-Université de Strasbourg (UNISTRA)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), univOAK, Archive ouverte
Jazyk: angličtina
Rok vydání: 1991
Předmět:
Zdroj: European Journal of Biochemistry
European Journal of Biochemistry, Wiley, 1991, 196 (3), pp.735-742
ISSN: 0014-2956
1432-1327
Popis: The primary-structure comparison of natural insect defensin A from Phormia terranovae and recombinant insect defensin A from Saccharomyces cerevisiae has been accomplished using a combination of Edman degradation and liquid secondary ion mass spectrometry. The natural and recombinant proteins have the same primary structure with identical disulfide-bond designations (formula; see text) as determined from the peptides obtained after thermolysin digestion. The combined use of Edman degradation and mass spectometry allowed the disulfide-bridge structure to be determined with a total of only 40 micrograms (9.9 nmol) natural peptide. Mass spectrometry provides a rapid means of disulfide-bridge verification, requiring not more than 20 micrograms recombinant insect defensin A, which is compatible with use in batch analysis.
Databáze: OpenAIRE