Quantitative monitoring of galactolipid hydrolysis by pancreatic lipase-related protein 2 using thin layer chromatography and thymol-sulfuric acid derivatization

Autor: Frédéric Carrière, Jean-David Rodier, Jérôme Lecomte, Pierre Villeneuve, Moulay Sahaka, Dominique Lafont, Brigitte Gontero, Sawsan Amara
Přispěvatelé: Bioénergétique et Ingénierie des Protéines (BIP ), Aix Marseille Université (AMU)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Lipolytech, Département Performances des systèmes de production et de transformation tropicaux (Cirad-PERSYST), Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement (Cirad), Ingénierie des Agro-polymères et Technologies Émergentes (UMR IATE), Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement (Cirad)-Université de Montpellier (UM)-Institut National de Recherche pour l’Agriculture, l’Alimentation et l’Environnement (INRAE)-Institut Agro - Montpellier SupAgro, Institut national d'enseignement supérieur pour l'agriculture, l'alimentation et l'environnement (Institut Agro)-Institut national d'enseignement supérieur pour l'agriculture, l'alimentation et l'environnement (Institut Agro), Démarche intégrée pour l'obtention d'aliments de qualité (UMR QualiSud), Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement (Cirad)-Institut de Recherche pour le Développement (IRD)-Avignon Université (AU)-Université de La Réunion (UR)-Université de Montpellier (UM)-Institut Agro - Montpellier SupAgro, Gattefossé, Institut de Chimie et Biochimie Moléculaires et Supramoléculaires (ICBMS), Université Claude Bernard Lyon 1 (UCBL), Université de Lyon-Université de Lyon-École Supérieure de Chimie Physique Électronique de Lyon (CPE)-Institut National des Sciences Appliquées de Lyon (INSA Lyon), Université de Lyon-Institut National des Sciences Appliquées (INSA)-Institut National des Sciences Appliquées (INSA)-Institut de Chimie du CNRS (INC)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Agence Nationale de la Recherche, Aix-Marseille Université, Centre National de la Recherche Scientifique, ANR-09-CP2D-0006,GALACTOLIPASE,Utilisation de galactolipases pour extraire les acides gras de la principale source de lipides présente sur la terre. - Using galactolipases for extracting fatty acids from the main source of lipids on the earth.(2009), Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Aix Marseille Université (AMU), Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement (Cirad)-Centre international d'études supérieures en sciences agronomiques (Montpellier SupAgro)-Université de Montpellier (UM)-Institut national d’études supérieures agronomiques de Montpellier (Montpellier SupAgro), Institut national d'enseignement supérieur pour l'agriculture, l'alimentation et l'environnement (Institut Agro)-Institut national d'enseignement supérieur pour l'agriculture, l'alimentation et l'environnement (Institut Agro)-Institut National de Recherche pour l’Agriculture, l’Alimentation et l’Environnement (INRAE), Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement (Cirad)-Institut de Recherche pour le Développement (IRD)-Avignon Université (AU)-Université de La Réunion (UR)-Université de Montpellier (UM)-Institut national d’études supérieures agronomiques de Montpellier (Montpellier SupAgro), Université de Lyon-Université de Lyon-Institut National des Sciences Appliquées de Lyon (INSA Lyon), Université de Lyon-Institut National des Sciences Appliquées (INSA)-Institut National des Sciences Appliquées (INSA)-Institut de Chimie du CNRS (INC)-École Supérieure Chimie Physique Électronique de Lyon-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)
Jazyk: angličtina
Rok vydání: 2021
Předmět:
L51 - Physiologie animale - Nutrition
Carbohydrate
Galactolipid
Clinical Biochemistry
030226 pharmacology & pharmacy
01 natural sciences
Biochemistry
Intestinal absorption
Analytical Chemistry
03 medical and health sciences
Hydrolysis
chemistry.chemical_compound
0302 clinical medicine
Analyse quantitative
[CHIM.ANAL]Chemical Sciences/Analytical chemistry
L50 - Physiologie et biochimie animales
[SDV.BBM.BC]Life Sciences [q-bio]/Biochemistry
Molecular Biology/Biochemistry [q-bio.BM]
Derivatization
Galactolipase activity
Dietary lipids
gastrointestinal lipolysis
Chromatography
Lipolyse
Chemistry
Chromatographie en couche mince
010401 analytical chemistry
Galactose
Galactolipids
Glycolipide
galactolipase
Cell Biology
General Medicine
Thin-layer chromatography
0104 chemical sciences
Acide gras
enzyme
Reagent
Digestion
Glycolipids
Réactif chimique
[SDV.AEN]Life Sciences [q-bio]/Food and Nutrition
Zdroj: Journal of Chromatography B Biomedical Sciences and Applications
Journal of Chromatography B Biomedical Sciences and Applications, 2021, 1173, pp.122674. ⟨10.1016/j.jchromb.2021.122674⟩
Journal of Chromatography. B
Journal of Chromatography B Biomedical Sciences and Applications, Elsevier, 2021, 1173, pp.122674. ⟨10.1016/j.jchromb.2021.122674⟩
ISSN: 0378-4347
DOI: 10.1016/j.jchromb.2021.122674⟩
Popis: International audience; Galactolipids are the most abundant lipids on earth where they are mainly found in photosynthetic membranes of plant, algae, and cyanobacteria. Pancreatic lipase-related protein 2 (PLRP2) is an enzyme with galactolipase activity allowing mammals, especially herbivores, to digest this important source of fatty acids. We present a method for the quantitative analysis of galactolipids and galactosylated products resulting from their digestion by guinea pig PLRP2 (GPLRP2), using thin-layer-chromatography (TLC), thymolsulfuric acid as derivatization reagent and scanning densitometry for detection. Thymolsulfuric acid reagent has been used for the colorimetric detection of carbohydrates. It is shown here that the derivatization of galactosyl group from galactolipids by this reagent is not affected by the bound acyl glycerol, acyl chains length and number of galactose residues in the polar head. This allowed quantifying simultaneously the initial substrate and all galactosylated products generated upon the hydrolysis of monogalactosyl di-octanoylglycerol (C8-MGDG) by GPLRP2 using a single calibration with C8-MGDG as reference standard. The reaction products, monogalactosyl monooctanoyl glycerol (C8-MGMG) and monogalactosyl glycerol (MGG), were identified and quantified, MGG being recovered from the aqueous and analyzed by a separate TLC analysis. This method is therefore suitable to quantify the products resulting from the release of both fatty acids present in MGDG and thereby shows that PLRP2 can contribute to the complete digestion of galactolipids and further intestinal absorption of their fatty acids.
Databáze: OpenAIRE
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