Producción y evaluación del antígeno recombinante TES-30 de Toxocara canis para el inmunodiagnóstico de toxocariasis

Autor: Jairo A. Mesa, Gisela García, Jorge Botero, Juan F. Alzate, Ana M. Olave, Edwin Patiño
Jazyk: angličtina
Rok vydání: 2016
Předmět:
Zdroj: Biomédica: revista del Instituto Nacional de Salud, Vol 36, Iss 1, Pp 39-51 (2016)
Redalyc
ISSN: 0120-4157
Popis: Introduccion. Toxocara canis es un nematodo patogeno de canidos que accidentalmente puede ser transmitido a los humanos. A pesar de la importancia de la serologia para el diagnostico de esta zoonosis, los kits diagnosticos usan antigenos crudos de excrecion-secrecion, en su mayoria glucoproteinas que no son especificas de especie, por lo cual pueden presentarse reacciones cruzadas con anticuerpos generados contra otros parasitos. Objetivos. Producir el antigeno recombinante TES-30 de T. canis y evaluarlo para el inmunodiagnostico de la toxocariasis. Materiales y metodos. Se clono el gen que codifica TES-30 en el vector de expresion pET28a (+), usando oligonucleotidos de cadena sencilla unidos mediante reaccion en cadena de la polimerasa (PCR). La proteina rTES-30 se purifico por cromotografia de afinidad (Ni2+). La reaccion serologica de rTES-30 se evaluo mediante immunoblot. Teniendo en cuenta que no existe una prueba de referencia, se observo el comportamiento del antigeno en comparacion con la prueba de rutina para el inmunodiagnostico de la toxocariasis, es decir, la tecnica ELISA convencional con antigenos de excrecion-secrecion. Resultados. El rTES-30 se produjo a partir de un cultivo de Escherichia coli LB, con un rendimiento de 2,25 mg/l y 95 % de pureza. La concordancia de la reaccion entre el immunoblot rTES-30 y la ELISA convencional, fue de 73 % (46/63) y de 100 % con los 21 sueros no reactivos. De los 21 sueros con diagnostico de otras parasitosis, 19 fueron reactivos con ELISA, mientras que tan solo siete fueron positivos con el immunoblot rTES-30. La concordancia entre la ELISA y el immunoblot fue moderada (indice kappa de 0,575; IC95% 0,41-0,74). Conclusiones. Los datos presentados respaldan la utilidad del immunoblot rTES-30 para la confirmacion de los posibles positivos por ELISA, no solo en los estudios epidemiologicos, sino tambien, como candidato para el desarrollo de pruebas diagnosticas de la toxocariasis ocular en Colombia.
Databáze: OpenAIRE
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