Small fluorescence-activating and absorption-shifting tag for tunable protein imaging in vivo
Autor: | Jérôme Quérard, Frederico M. Pimenta, Nelly Morellet, Julien Rossignol, Sophie Vriz, Ewen Lescop, Carole Gauron, Yong Chen, Michel Volovitch, Thomas Le Saux, Sylvie Maurin, Christian G. Specht, Arnaud Gautier, Ludovic Jullien, Marie-Aude Plamont, Antoine Triller, Buyan Pan, Jian Shi, Emmanuelle Billon-Denis, Karine Moncoq |
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Přispěvatelé: | HAL-UPMC, Gestionnaire, Département de Chimie - ENS Paris, École normale supérieure - Paris (ENS-PSL), Université Paris sciences et lettres (PSL)-Université Paris sciences et lettres (PSL), Processus d'Activation Sélective par Transfert d'Energie Uni-électronique ou Radiatif (UMR 8640) (PASTEUR), Université Pierre et Marie Curie - Paris 6 (UPMC)-Département de Chimie - ENS Paris, Université Paris sciences et lettres (PSL)-Université Paris sciences et lettres (PSL)-École normale supérieure - Paris (ENS-PSL), Université Paris sciences et lettres (PSL)-Université Paris sciences et lettres (PSL)-Institut de Chimie du CNRS (INC)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Centre interdisciplinaire de recherche en biologie (CIRB), Labex MemoLife, Université Paris sciences et lettres (PSL)-Université Paris sciences et lettres (PSL)-Collège de France (CdF (institution))-Ecole Superieure de Physique et de Chimie Industrielles de la Ville de Paris (ESPCI Paris), Université Paris sciences et lettres (PSL)-École normale supérieure - Paris (ENS-PSL), Université Paris sciences et lettres (PSL)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Institut de biologie de l'ENS Paris (IBENS), Département de Biologie - ENS Paris, Université Paris sciences et lettres (PSL)-Université Paris sciences et lettres (PSL)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-École normale supérieure - Paris (ENS-PSL), Université Paris sciences et lettres (PSL)-Université Paris sciences et lettres (PSL)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Institut de Chimie des Substances Naturelles (ICSN), Institut de Chimie du CNRS (INC)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Université Paris Diderot - Paris 7 (UPD7), École normale supérieure - Paris (ENS Paris), Université Paris sciences et lettres (PSL)-Université Paris sciences et lettres (PSL)-École normale supérieure - Paris (ENS Paris), Université Paris sciences et lettres (PSL)-Université Paris sciences et lettres (PSL)-Ecole Superieure de Physique et de Chimie Industrielles de la Ville de Paris (ESPCI Paris), Université Paris sciences et lettres (PSL)-Collège de France (CdF (institution))-École normale supérieure - Paris (ENS Paris), Université Paris sciences et lettres (PSL)-Collège de France (CdF (institution))-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Institut de biologie de l'ENS Paris (UMR 8197/1024) (IBENS), Université Paris sciences et lettres (PSL)-Université Paris sciences et lettres (PSL)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-École normale supérieure - Paris (ENS Paris), Université Paris sciences et lettres (PSL)-Université Paris sciences et lettres (PSL)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Institut de Chimie du CNRS (INC), Université Paris sciences et lettres (PSL)-École normale supérieure - Paris (ENS Paris), Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Département de Biologie - ENS Paris, Université Paris sciences et lettres (PSL)-Université Paris sciences et lettres (PSL)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-École normale supérieure - Paris (ENS Paris), Université Paris sciences et lettres (PSL)-Université Paris sciences et lettres (PSL)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS) |
Rok vydání: | 2015 |
Předmět: |
0301 basic medicine
Embryo Nonmammalian Cell Survival Recombinant Fusion Proteins Protein tag Yeast display Corrections Fluorescence Green fluorescent protein 03 medical and health sciences Imaging Three-Dimensional fluorescence imaging [CHIM] Chemical Sciences Organelle Animals Humans [CHIM]Chemical Sciences directed evolution Zebrafish Multidisciplinary Staining and Labeling Chemistry Absorption Radiation Cell sorting Ligand (biochemistry) Directed evolution fluorogenic ligand 030104 developmental biology Biochemistry Physical Sciences Biophysics Genetic Engineering HeLa Cells Subcellular Fractions |
Zdroj: | Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2016, 113 (3), pp.497-502. ⟨10.1073/pnas.1513094113⟩ Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, National Academy of Sciences, 2016, 113 (3), pp.497-502. ⟨10.1073/pnas.1513094113⟩ |
ISSN: | 1091-6490 0027-8424 |
Popis: | International audience; This paper presents Yellow Fluorescence-Activating and absorption-Shifting Tag (Y-FAST), a small monomeric protein tag, half as large as the green fluorescent protein, enabling fluorescent labeling of proteins in a reversible and specific manner through the reversible binding and activation of a cell-permeant and nontoxic fluorogenic ligand (a so-called fluorogen). A unique fluorogen activation mechanism based on two spectroscopic changes, increase of fluorescence quantum yield and absorption red shift, provides high labeling selectivity. Y-FAST was engineered from the 14-kDa photoactive yellow protein by directed evolution using yeast display and fluorescence-activated cell sorting. Y-FAST is as bright as common fluorescent proteins, exhibits good photostability, and allows the efficient labeling of proteins in various organelles and hosts. Upon fluorogen binding, fluorescence appears instantaneously, allowing monitoring of rapid processes in near real time. Y-FAST distinguishes itself from other tagging systems because the fluorogen binding is highly dynamic and fully reversible, which enables rapid labeling and unlabeling of proteins by addition and withdrawal of the fluorogen, opening new exciting prospects for the development of multiplexing imaging protocols based on sequential labeling. |
Databáze: | OpenAIRE |
Externí odkaz: |