Determination of metal associated with proteins of wheat seed samples after sequential extraction procedure
| Autor: | Letícia M. Costa, Adriano Marçal Pimenta, Leila M. Bittencourt, Agenor Valadares Santos, Diogo A. P. D. Lana, Ana Paula F. Gonçalves, Rodinei Augusti |
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| Jazyk: | angličtina |
| Rok vydání: | 2014 |
| Předmět: |
Chromatography
Protein digestion Extraction (chemistry) metalloprotein Fraction (chemistry) 1D SDS-PAGE General Chemistry Mass spectrometry Metal chemistry.chemical_compound GF AAS chemistry visual_art wheat visual_art.visual_art_medium Sodium dodecyl sulfate Graphite furnace atomic absorption MALDI-TOF-MS/MS Polyacrylamide gel electrophoresis |
| Zdroj: | Journal of the Brazilian Chemical Society, Volume: 25, Issue: 2, Pages: 264-270, Published: FEB 2014 Journal of the Brazilian Chemical Society v.25 n.2 2014 Journal of the Brazilian Chemical Society Sociedade Brasileira de Química (SBQ) instacron:SBQ |
| Popis: | This work was initially conducted to study the distribution of Cu, Fe, Mn and Zn in the protein fractions of wheat sample subjected to sequential extraction procedure. The highest metal concentrations were determined in the fraction extracted with Tris-HCl buffer containing 1% sodium dodecyl sulfate (SDS). The fractions of wheat sample obtained after the extraction procedure were analyzed by one-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (1D SDS-PAGE) and protein bands were treated to quantify Cu, Fe, Mn, and Zn by graphite furnace atomic absorption spectrometry (GF AAS). Metals were associated to protein bands of specific molecular weight, determined using a standard protein. The protein fractions were also analyzed by matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) after a typical protein digestion protocol, identifying lipid transfer protein and grain softness, the latter being possibly associated to Mn. Este trabalho foi conduzido para estudar a distribuição de Cu, Fe, Mn e Zn nas frações proteicas de amostras de trigo submetidas a um procedimento de extração sequencial. Maiores concentrações dos elementos foram determinadas na fração extraída com tampão Tris-HCl contendo 1% de dodecil sulfato de sódio (SDS). As frações da amostra de trigo obtidas após o procedimento de extração foram analisadas por eletroforese em gel de poliacrilamida unidimensional (1D SDS-PAGE) e as bandas de proteínas foram tratadas para quantificar os metais por espectrometria de absorção atômica em forno de grafite (GF AAS). Desta forma, foi possível associar os metais Cu, Fe, Mn e Zn às bandas proteicas de peso molecular específico. As frações proteicas da amostra de trigo foram analisadas por espectrometria de massas por tempo de vôo acoplada à ionização dessortiva de matriz por laser (MALDI-TOF-MS), após procedimento de digestão proteica, identificando-se as proteínas lipid transfer e grain softness, sendo esta última possivelmente associada ao metal manganês. |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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