Extraction and Estimation of ATP from Human Spermatozoa

Autor: D. Mendelsohn, Y. R. Bilgeri, G. Lyons, A. Zanzinger, M. Berzin
Rok vydání: 2009
Předmět:
Zdroj: Andrologia. 18:455-460
ISSN: 1439-0272
0303-4569
DOI: 10.1111/j.1439-0272.1986.tb01808.x
Popis: Summary: This study attempts to provide guidelines for the extraction and estimation of ATP from spermatozoa. The conditions of extraction of ATP from spermatozoa using trichloroacetic acid were optimized. The efficiency of this extraction procedure was compared to that using boiling Tris buffer. Three commercially available kits which use the firefly luciferase assay for ATP and two luminometers were evaluated for the measurement of the spermatozoa extracts. Elevated levels of Mg2+ and/or Ca2+ did not interfere with the extration of ATP by trichloroacetic acid or with the subsequent estimation of the nu-cleotide. Extraktion und Bestimmung von ATP in menschlichen Spermatozoen Zusammenfassung: Die vorliegende Untersuchung versucht Richtlinien aufzustellen fur die Extraktion und Bestimmung von ATP in menschlichen Spermatozoen. Die Extrak-tionsbedingungen fur ATP wurden unter Verwendung von Trichloressigsaure optimiert. Die Effizienz des Extraktionsverfahrens wurde mit einem Verfahren verglichen, bei wel-chem siedender Tris-Puffer Verwendung fand. Es wurden drei handelsubliche Kits, welche den Leuchtkafer-Luciferase-Assay fur ATP und zwei Luminometer benutzen, fur die Mes-sung der Spermatozoenextrakte bewertet. Die erhohten Werte von Mg2+ und/oder Ca2+ interferiersen nicht mit der Extraktion von ATP mittels Trichloressigsaure oder mit der nachtraglichen Bestimmung des Nukleotids.
Databáze: OpenAIRE
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