Ocorrência, caracterização do perfil genético, e susceptibilidade aos antimicrobianos de Listeria monocytogenes em produtos derivados de frutas

Autor: Munive Núñez, Karen Vanessa, 1989
Přispěvatelé: Kabuki, Dirce Yorika, 1964, Crucello, Aline, Penteado, Ana Lucia Pontes, Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Engenharia de Alimentos, Programa de Pós-Graduação em Ciência de Alimentos, UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
Rok vydání: 2021
Předmět:
Zdroj: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron:UNICAMP
DOI: 10.47749/t/unicamp.2017.990674
Popis: Orientador: Dirce Yorika Kabuki Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: Listeria monocytogenes é um patógeno alimentar psicrotrófico, presente em diversos tipos de alimentos e pode causar doença severa com alto índice de mortalidade. As frutas são susceptíveis de serem contaminadas com micro-organismos e a ocorrência depende do tipo de fruta e das condições de crescimento e colheita. Nos Estados Unidos da América e Europa, as frutas têm sido reconhecidas como responsáveis por surtos de listeriose, mas no Brasil, a listeriose é desconhecida pela maioria da população e poucos estudos sobre a ocorrência e multiplicação de L. monocytogenes em frutas têm sido relatados. Diante do exposto, os objetivos deste trabalho foram avaliar a ocorrência de L. monocytogenes em polpas de frutas congeladas e frutas minimamente processadas, caracterizar o perfil genético dos isolados de L. monocytogenes mediante a detecção dos genes de virulência inlA, inlB, plcA, plcB, prfA e actA por PCR convencional, e analisar o perfil de susceptibilidade dos isolados aos antimicrobianos: ampicilina, ciprofloxacina, gentamicina, ceftriaxona, cefalotina, cloranfenicol, tetraciclina, penicilina G e sulfametoxazol/trimetoprim pelo método de disco difusão em ágar. Foi analisado um total de 160 amostras (80 de polpas de frutas congeladas e 80 de frutas minimamente processadas), utilizando-se a metodologia proposta pelo "Health Protection Branch" do Canadá. Listeria spp. não foi isolada de polpas de frutas congeladas. Nas amostras de frutas minimamente processadas foi encontrada Listeria sp. em 5% (4/80) das amostras, sendo: uma amostra de coco ralado, uma de seleta de frutas, uma de melão Orange e uma de melão Gália. A espécie L. monocytogenes foi identificada mediante ensaio da PCR do gene hlyA e a espécie foi confirmada em uma amostra de melão Gália e uma de melão Orange. Na pesquisa dos genes de virulência, 100% (9/9) dos isolados apresentaram resultados positivos para os genes inlA, inlB, plcA, plcB, prfA e actA, apresentando este último gene um polimorfismo alélico que o caracteriza como tipo alélico 3 de actA. Quanto à resistência aos antimicrobianos, 100% (9/9) dos isolados de L. monocytogenes apresentaram susceptibilidade a 6 dos 9 antibióticos testados. Tais agentes antimicrobianos foram: ampicilina, ciprofloxacina, tetraciclina, cefalotina, cloranfenicol e sulfametoxazol/trimetoprim. Todos os isolados apresentaram resistência apenas à ceftriaxona (100%) e nenhuma cepa apresentou multirresistência. O presente trabalho evidencia que o melão constitui uma potencial fonte de transmissão de L. monocytogenes, deste modo é importante o controle rigoroso durante a produção de frutas minimamente processadas, para que este patógeno não represente um risco para a saúde pública Abstract: Listeria monocytogenes is a psychotropic food pathogen, present in several types of food and can cause severe disease with high mortality rate. Fruits are contaminated with microorganisms and the occurrence depends on the type of fruit and growth and harvest conditions. In the United States and Europe, fruits have been recognized as responsible for outbreaks of listeriosis, but in Brazil, listeriosis is unknown by most of people and few studies on the occurrence and multiplication of L. monocytogenes in fruits have been reported. Thus, the objectives of this work were to evaluate the occurrence of L. monocytogenes in frozen fruit pulps and minimally processed fruits, to characterize the genetic profile of L. monocytogenes isolates by detecting the virulence genes inlA, inlB, plcA, plcB, prfA and actA by conventional PCR, and to analyze the susceptibility profile of the isolates to antimicrobial agents: ampicillin, ciprofloxacin, gentamicin, ceftriaxone, cephalothin, chloramphenicol, tetracycline, penicillin G and sulfamethoxazole / trimethoprim by the disk diffusion method. A total of 160 samples was analyzed (80 of frozen fruit pulps and 80 of minimally processed fruits), using the methodology proposed by the "Health Protection Branch of Canada". Listeria spp. was not isolated from frozen fruit pulps. Among the of minimally processed fruits, Listeria sp. was found in 5% (4/80) of the samples corresponding to one sample of grated coconut, one fruit salad, one Orange melon and one Galia melon. L. monocytogenes was identified by PCR assay for gene hlyA and the species was confirmed in a sample one Galia melon and one of Orange melon. In the study of virulence genes, 100% (9/9) of the isolates presented positive results for the genes inlA, inlB, plcA, plcB, prfA and actA. The gene actA was characterized as allelic type 3. Regarding to antimicrobial resistance, 100% (9/9) of the L. monocytogenes isolates showed susceptibility to 6 of the 9 antibiotics tested. Such antimicrobial agents were: ampicillin, ciprofloxacin, tetracycline, cephalothin, chloramphenicol and sulfamethoxazole / trimethoprim. All isolates presented resistance to ceftriaxone (100%) and none of isolates presented multi-resistance. The present work shows that melon constitutes a potential source of transmission of L. monocytogenes, therefore, strict control during the production of minimally processed fruits is important, so that this pathogen does not present a risk to public health Mestrado Ciência de Alimentos Mestra em Ciência de Alimentos CNPQ 132974/2015-0
Databáze: OpenAIRE
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