ELISA r-p24: desenvolvimento e validação de um ensaio imunoenzimático para o diagnóstico de infecções causadas pelo Vírus da Imunodeficiência Felina

Autor: Maria das Graças Miranda Danelli, Mariana Miguez, Hilton Jorge Nascimento, Carlos Mazur, José Godinho da Silva Junior, Marli Sidoni
Jazyk: angličtina
Rok vydání: 2018
Předmět:
Zdroj: Brazilian Journal of Veterinary Medicine; Vol. 39 No. 2 (2017); 83-89
Revista Brasileira de Medicina Veterinária; v. 39 n. 2 (2017); 83-89
Brazilian Journal of Veterinary Medicine
Sociedade de Medicina Veterinária do Estado do Rio de Janeiro (SOMVERJ)
instacron:SBMV
ISSN: 2527-2179
0100-2430
Popis: The Feline Immunodeficiency Virus (FIV) is a lentivirus that affects cats worldwide. The detection ofthe virus’ 24 Kda capsid protein (p24) antibody is the most common way to diagnose FIV infections.In Brazil, the most used commercial assay for FIV diagnosis is a rapid ELISA test based on the lateralflow principle, with high sensitivity and specificity (SNAP®test). However, the high cost of this importedassay undermines not only the diagnosis of this infection but also its epidemiology. The objective of thisstudy was to optimize and validate an indirect ELISA using the protein p24 recombinant antigen (r-p24)with national technology and maintaining sensitivity and specificity comparable to those of availablecommercial rapid ELISA tests. Twenty-six reference cats’ sera samples (13 negative and 13 positives for FIV),previously analyzed by PCR and the SNAP® test, were used as a reference to optimize the ELISA. Serumsamples of 226 cats from private owners and from shelters of the metropolitan area of Rio de Janeirowere used to validate the assay. The sensitivity and specificity of the r-p24 ELISA were 95.4% and 99.4%,respectively. When compared to the SNAP® Combo Test, the accuracy of r-p24 ELISA was 99%, with aKappa index of 0.96. Our results indicate that the national technology-based ELISA r-p24 has sensibilityand specificity values that are comparable to rapid ELISA kits. This test is therefore recommendable, usingnational technology for FIV routine diagnosis, research, and epidemiological studies. O Vírus da Imunodeficiência Felina (FIV) é um lentivírus que afeta gatos em todo o mundo. A detecçãodo anticorpo para proteína do capsídeo viral de 24 kDa (p24) é a forma mais comum para diagnosticarinfecções pelo FIV. No Brasil, o ensaio comercial mais utilizado no diagnóstico FIV é um teste rápidode ELISA (SNAP®test), baseado no princípio de fluxo lateral, com alta sensibilidade e especificidade.No entanto, o alto custo deste ensaio importado inviabiliza não só o diagnóstico da infecção, como tambémsua epidemiologia. O objetivo deste trabalho foi aperfeiçoar e validar um teste de ELISA indireto, comtecnologia nacional, utilizando o antígeno recombinante da proteína p24 (r-p24), com sensibilidade eespecificidade comparáveis às dos testes rápidos, comercialmente disponíveis. Vinte e seis amostras desoro gatos (13 negativos e 13 positivos para FIV), previamente analisados por PCR e Snap®, foram utilizadascomo amostras de referência para aperfeiçoar o ELISA e 226 amostras de soro de gatos, de proprietáriosprivados ou de abrigos da área metropolitana Rio de Janeiro foram utilizadas para validar o ensaio. O ELISAr-p24 apresentou uma sensibilidade de 95,4% e 99,4% de especificidade quando comparadas às do testeSNAP Combo, uma precisão de 99% e um índice Kappa de 0.96. Nossos resultados indicam que o ELISAr-p24 apresentou sensibilidade e especificidade comparáveis às dos testes rápidos, utilizando tecnologianacional para diagnóstico, pesquisa e estudos epidemiológicos do FIV.
Databáze: OpenAIRE
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