Nonradioactive Detection of Small RNAs Using Digoxigenin-Labeled Probes
Autor: | Ariel Hernán Tomassi, Damián Alejandro Cambiagno, Pablo Andrés Manavella, Delfina Gagliardi |
---|---|
Přispěvatelé: | Carbonell, Alberto |
Rok vydání: | 2017 |
Předmět: |
0106 biological sciences
0301 basic medicine Small RNA Chemistry RNA MicroRNA Northern blot Bioquímica y Biología Molecular 01 natural sciences Polyacrylamide electrophoresis Ciencias Biológicas Blot 03 medical and health sciences Nucleic acid thermodynamics chemistry.chemical_compound 030104 developmental biology Biochemistry microRNA Digoxigenin labeling Digoxigenin Polyacrylamide gel electrophoresis CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS 010606 plant biology & botany |
Zdroj: | Methods in Molecular Biology ISBN: 9781493971640 Plant Argonaute Proteins : Methods and Protocols. Methods in Molecular Biology |
DOI: | 10.1007/978-1-4939-7165-7_14 |
Popis: | Small RNAs have been traditionally detected and quantified using small RNA blots, a modified Northern blot technique. The small RNAs are size-fractionated from the rest of the cellular RNA molecules by polyacrylamide gel electrophoresis and transferred by blotting onto a positively charged membrane. A radiolabeled probe was then traditionally used to detect a specific small RNA in the cellular pool. Small RNA blotting is a relatively simple, inexpensive approach to visualize small RNAs without artifacts. However, the radioactive labeling of the probe is sometimes an impediment, especially due to the requirement of specialized facilities. Here we describe a sensitive and simple method to detect and quantify small RNAs using digoxigenin-based nonradioactive RNA blots. Fil: Tomassi, Ariel Hernán. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral; Argentina Fil: Gagliardi, Delfina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral; Argentina Fil: Cambiagno, Damián Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral; Argentina Fil: Manavella, Pablo Andrés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral; Argentina |
Databáze: | OpenAIRE |
Externí odkaz: |