Identificación de una triparedoxina peroxidasa citoplasmática en Leishmania braziliensis
| Autor: | Sharon Eliana Villamil-Silva, Luis Ernesto Contreras-Rodríguez, Gonzalo Jair Díaz Gonzalez, María Helena Ramírez-Hernández, Lesly Johanna Ortiz-Joya |
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| Rok vydání: | 2021 |
| Předmět: |
chemistry.chemical_classification
biology Chemistry Intracellular parasite Trypanothione Heterologous General Chemistry biology.organism_classification medicine.disease_cause Leishmania braziliensis chemistry.chemical_compound Enzyme Biochemistry Polyclonal antibodies medicine biology.protein NAD+ kinase Escherichia coli |
| Zdroj: | Revista Colombiana de Química. 50:3-14 |
| ISSN: | 2357-3791 0120-2804 |
| DOI: | 10.15446/rev.colomb.quim.v50n2.91721 |
| Popis: | Los sistemas de defensa anti-oxidante utilizados por el parásito intracelular Leishmania braziliensis durante el proceso de infección permiten eliminar especies reactivas de oxígeno y nitrógeno a expensas de equivalentes reductores derivados de la tripanotiona, evitando daños celulares del patógeno. Con el objetivo de identificar potenciales blancos moleculares para el desarrollo de fármacos contra este parásito, se realizó la detección de la enzima triparedoxina peroxidasa citoplasmática de L. braziliensis (LbTXNPxII), la cual es esencial para disminuir concentraciones tóxicas de peróxido de hidrógeno en el contexto de infección. Para esto se generaron anticuerpos policlonales en modelo aviar, partiendo de la clonación, expresión y purificación de la proteína recombinante 6xHis-SUMO-LbTXNPxII (37kDa) en el sistema heterólogo Escherichia coli. La proteína purificada se utilizó como antígeno para la producción de anticuerpos IgY, cuya implementación en estudios in situ permitió detectar y localizar la enzima LbTXNPxII endógena (22kDa) en el citoplasma de promastigotes fijados y verificar su interacción molecular con la nicotinamida/nicotinato mononucleótido adenilil transferasa, enzima involucrada en la síntesis del NAD. De este modo, se reporta el desarrollo de una herramienta bioquímica para la identificación y estudio de la enzima LbTXNPxII y su participación en vías del metabolismo energético y de defensa anti-oxidante. |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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