| Popis: |
Η αναγνώριση του ρόλου των μεσεγχυματικών κύτταρων (MSC) στην αιμοποίηση, ως μέρος του μικροπεριβάλλοντος του μυελού των οστών (ΒΜ), ανανέωσε το ενδιαφέρον για χρήση τους στην έκπτυξη αρχέγονων αιμοποιητικών κυττάρων (HSC) ομφαλοπλακουντιακό αίμα (CB). Η παρούσα μελέτη επικεντρώνεται στην αξιολόγηση της ex vivo έκπτυξης τόσο των CB-CD133+ όσο και CB- και ΒΜ-CD34+ HSC, παρουσία κυττάρων στρώματος με ή χωρίς τη προσθήκη αυξητικών παραγόντων. Τα HSC προέκυψαν μετά από ανοσομαγνητικό διαχωρισμό από CB και BM παιδιών. Καλλιεργήθηκαν για 10 ημέρες παρουσία ΜSC από BM παιδιών με τη προσθήκη ή όχι συνδυασμών αυξητικών παραγόντων που δρουν σε όψιμη ή πρώιμη φάση της αιμοποίησης, Πραγματοποιήθηκε ανοσοφαινοτυπικός χαρακτηρισμός, μελέτη ανάπτυξης αποικιών CFU-GM, αξιολόγηση των επιπέδων SDF-1a/Angio (με μέθοδο ELISA) και έκφρασης των μεταγραφικών παραγόντων Oct-4, Sox2, Nanog (με qPCR) των πληθυσμών που προέκυψαν μετά την ex-vivo έκπτυξη. Τα αποτελέσματά έδειξαν ότι δεν ήταν εφικτή η απόδοση καθαρού πληθυσμού CD133+. Τα MSC που προέρχονται από μυελό των οστών φαίνεται να υποστηρίζουν την έκπτυξη πληθυσμών με χαρακτηριστικά αρχεγονότητας, φαινόμενο που ενισχύεται με τη προσθήκη αυξητικών παραγόντων στη καλλιέργεια. Δεν παρατηρήθηκε διαφορά στα αποτελέσματα της έκπτυξης μεταξύ των συνδυασμών αυξητικών παραγόντων που δρουν σε πρώιμη ή όψιμη φάση της αιμοποίησης. Τα βιολογικά χαρακτηριστικά των CB αιμοποιητικών αρχέγονων κυττάρων φαίνεται να τα καθιστά πιο κατάλληλα από τα αντίστοιχα αυτόλογα του BM για την ex vivo έκπτυξη CD34+ κυττάρων. Η μεθοδολογική τυποποίηση και η καθιέρωση κατευθυντήριων οδηγιών είναι απαραίτητη για τη χρήση τους σε κλινικές εφαρμογές. |
