In-vitro-Studie zum Einfluss von Fibrin in Knorpelkonstrukten auf der Basis von PGA-Vliesstoffen

Autor: Alexander T. Mehlhorn, Jörn Zwingmann, Günter Finkenzeller, C. Kurze, Wolfgang Köstler, Philipp Niemeyer, Hagen Schmal, Martin Dauner, Norbert P. Südkamp
Rok vydání: 2008
Předmět:
Zdroj: Der Orthopäde. 37:424-434
ISSN: 1433-0431
0085-4530
DOI: 10.1007/s00132-008-1258-9
Popis: Die Matrixkomponente spielt bei der autologen Chondrozytentransplantation eine zentrale Rolle. Gegenstand dieser Studie war die Untersuchung des Einflusses einer Fibrinphase in Knorpelkonstrukten auf der Basis von Polyglykolsaure (PGA). Humane Chondrozyten wurden von Huftkopfen isoliert und serumfrei expandiert. PGA-91-Vliesstoffe wurden mit Zellen allein oder in einer Fibrinphase besiedelt und fur 14 Tage in vitro kultiviert. Neben der Untersuchung von Zellviabilitat, DNA-Gehalt, Kultur-pH-Wert und Aggrekanproduktion wurde mittels Real-time-PCR die mRNA-Expression von Typ-I- und -II-Kollagen sowie von Aggrekan bestimmt. Auserdem wurden die Konstrukte histologisch verglichen. Alle Konstrukte enthielten uber den untersuchten Zeitraum vitale, metabolisch aktive Zellen. Eine Zellproliferation innerhalb des Knorpeltransplantats fand nicht statt, der DNA-Gehalt war abnehmend. Der pH-Wert war im Untersuchungszeitraum physiologisch konstant. Die Alcian-Blau-Farbung zeigte die Proteoglykanproduktion sowie die homogene Zellverteilung. Es fand sich eine signifikant geringere Aggrekananreicherung im Uberstand der Fibrinkonstrukte (−24%), was mit den mRNA-Expressionsdaten korrelierte (−80%). Die mRNA-Expression von Kollagen Typ II war in den fibrinfreien Konstrukten im Kulturverlauf ansteigend und um 57% hoher als in den Fibrinkonstrukten. Der immunhistologische Nachweis von Typ-II-Kollagen war in allen Konstrukten moglich. Knorpelkonstrukte auf der Basis von Vliesstoffen sind aus zellbiologischer Sicht zum Einsatz fur die matrixassoziierte Chondrozytenimplantation geeignet. Die Ergebnisse weisen auf einen partiell inhibitorischen Effekt der Fibrinkomponente auf die chondrogene Differenzierung bei der Kombination mit PGA-Vliesstoffen hin.
Databáze: OpenAIRE
Externí odkaz: