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Cette etude resume l'optimisation des techniques pour la fecondation artificielle chez la carpe, y compris les ameliorations des solutions d'activation, du processus d'insemination, et d'elimination de la viscosite des oeufs. Pour obtenir de bons taux de fertilisation et d'eclosion, le rapport optimal se situe entre 8490 et 23 672 spermatozoides par oeuf, avec de l'eau du robinet dechloree. Le rapport optimal entre les oeufs (poids en grammes) et la solution d'activation (en millilitres) est definie comme etant de 1:1 a 1:2. Differentes concentrations de solutions d'activation, telles que NaCl de 0 a 34 mM (0 a 68 mOsmol kg -1 ) ne modifient pas les taux de fertilisation et d'eclosion. Une solution d'activation adoptee pour les spermatozoides de carpe (45 mM NaCl, 5 mM KCl, 30 mM Tris-HCl, pH 8) est comparee a d'autres solutions salines d'activation ; seule, la solution NaCl de 51 mM (102 mOsmol kg -1 ) diminue le taux de fertilisation et d'eclosion. La solution d'activation contenant 20 mM Tris-HCl a pH 9 augmente les taux de fertilisation et d'eclosion, comparee a l'eau du robinet dechloree de pH 7 ou a une solution d'activation de pH 6 et 7. La viscosite des oeufs est eliminee avec succes, par incubation dans l'alcalase DX (PLN 04715) avec deux etapes successives et differentes concentrations d'enzyme. La premiere etape, avec une concentration d'enzyme de 2 ml l -1 a ete appliquee de 8 a 20 min apres fertilisation. Dans une seconde etape, le meilleur temps d'application de l'alcalase, 20 ml l -1 , a ete de 45 et 60 s a 20 min apres fertilisation, conduisant a des taux de fertilisation et d'eclosion de 80-87 %. La α-chymotrypsine (EC 3.4.21.1. Merck) a ete aussi efficace pour l'elimination de la viscosite des oeufs mais avec des chances de succes beaucoup plus variables, dues aux differences environnementales, a la qualite de l'eau et aux differentes souches de carpe. |
